ABSTRAK
Kopi merupakan minuman yang populer, dan studi kohort sebelumnya menunjukkan bahwa kopi dapat mengurangi risiko degenerasi makula terkait usia (AMD). Namun, faktor-faktor pengganggu dalam studi ini memerlukan eksplorasi lebih lanjut tentang hubungan kausal menggunakan metode-metode canggih. Kami memperoleh data tentang konsumsi kopi dari studi asosiasi genom-lebar (GWAS) dan data ringkasan GWAS terkait AMD terbaru dari konsorsium Finngen R11. Kami menilai korelasi genetiknya menggunakan regresi skor ketidakseimbangan hubungan (LDSC), mengeksplorasi hubungan kausal menggunakan pengacakan Mendelian (MR), dan mengidentifikasi lokus genetik bersama melalui kolokalisasi. Hasil kami mengungkapkan korelasi genetik antara konsumsi kopi instan dan AMD kering, dengan setiap peningkatan deviasi standar (SD) dalam asupan kopi instan dikaitkan dengan rasio peluang (OR) yang sesuai sekitar 6,92 untuk AMD kering, yang menunjukkan peningkatan risiko 6,92 kali lipat. Namun, analisis kolokalisasi tidak menunjukkan varian genetik bersama antara konsumsi kopi instan dan AMD. Kopi instan dapat meningkatkan risiko AMD, dan mengurangi asupannya dapat membantu mencegah AMD kering. Orang-orang yang berisiko tinggi mengalami AMD harus menghindari kopi instan. Studi ini membantu dokter dalam mengidentifikasi faktor-faktor makanan, khususnya konsumsi kopi instan, sebagai risiko potensial untuk AMD. Dengan memberikan bukti kausal berbasis genetik, temuan kami mendukung pengembangan strategi pencegahan AMD yang dipersonalisasi. Dokter dapat menyarankan pasien untuk mengurangi asupan kopi instan berdasarkan profil risiko genetik, yang menawarkan pendekatan yang tepat untuk mengurangi risiko AMD kering. Intervensi ini dapat berkontribusi secara signifikan terhadap pencegahan dan pengobatan AMD.

1 Pendahuluan
Degenerasi makula terkait usia (AMD) adalah penyakit mata yang umum dan salah satu penyebab utama kebutaan ireversibel. AMD dapat diklasifikasikan menjadi dua jenis: AMD basah dan AMD kering, dibedakan berdasarkan ada atau tidaknya neovaskularisasi koroid (van Lookeren Campagne et al. 2014 ). Studi epidemiologi menunjukkan bahwa AMD mempengaruhi hampir 200 juta orang di seluruh dunia, dengan jumlah yang diperkirakan akan mencapai 290 juta pada tahun 2040 (Fleckenstein et al. 2024 ). Penelitian telah menunjukkan bahwa faktor genetik memainkan peran utama dalam perkembangan AMD, dengan banyak lokus genetik terkait AMD, gen kerentanan, dan faktor risiko telah diidentifikasi, memberikan petunjuk penting untuk mempelajari mekanisme AMD (Klein et al. 2005 ; Fritsche et al. 2014 ; Stahl 2020 ). Namun, mengingat mekanisme penyakit yang tidak jelas dan kompleksitas pengobatan, memperlambat perkembangan penyakit dan pencegahan tepat waktu sangatlah penting (Deng et al. 2022 ).

Kopi merupakan minuman yang umum, dan hubungan antara konsumsi kopi dan kesehatan manusia telah banyak dipelajari. Efek kopi terhadap penyakit mata dan penuaan telah dibuktikan sebelumnya (Kim et al. 2021 ; Li et al. 2022 ; Wei et al. 2023 ). Akan tetapi, hanya sedikit penelitian yang meneliti kopi dan AMD; penelitian kohort sebelumnya telah menunjukkan bahwa kopi dapat mengurangi risiko AMD dan memperlambat perkembangannya (Chiu et al. 2017 ). Selain itu, penelitian kohort sering kali mengalami bias karena adanya faktor pengganggu dan hubungan sebab akibat terbalik, yang menyebabkan kesalahan pada hasil (Song dan Chung 2010 ; Vassy et al. 2018 ). Oleh karena itu, perlu menggunakan metode baru untuk menilai secara komprehensif hubungan genetik antara konsumsi kopi dan AMD.

Regresi skor ketidakseimbangan hubungan (LDSC) dapat mengevaluasi korelasi genetik menggunakan statistik ringkasan GWAS, dan metode ini biasanya tidak terpengaruh oleh tumpang tindih sampel (Bulik-Sullivan et al. 2015 ; Zhang et al. 2021 ). Randomisasi Mendelian (MR) adalah metode yang menggunakan data ringkasan dari studi asosiasi genom-lebar (GWAS) untuk menilai efek kausal penyakit, diet, dan faktor-faktor lain pada hasil penyakit (Birney 2022 ; Sanderson et al. 2022 ). MR mengontrol faktor pengganggu potensial menggunakan variabel instrumental (IV) dan tidak terpengaruh oleh pengganggu lingkungan dan kausalitas terbalik (Sekula et al. 2016 ). Kolokalisasi Bayesian adalah metode yang digunakan untuk menentukan apakah dua atau lebih sifat atau penyakit memiliki varian genetik yang sama, dengan tujuan mengeksplorasi varian kausal potensial antara sifat-sifat (Rasooly et al. 2022 ). Menggabungkan hasil ketiga metode ini dapat memberikan bukti yang lebih andal tentang variasi genetik dan hubungan kausal antara konsumsi kopi dan AMD (Liu et al. 2024 ).

Dalam penelitian ini, kami melakukan inferensi kausal mengenai hubungan antara konsumsi kopi dan risiko AMD. Kami memadukan metode korelasi genetik, MR, dan kolokalisasi Bayesian untuk menganalisis hubungan genetiknya, dengan tujuan untuk mengeksplorasi dampak konsumsi kopi terhadap risiko AMD dan hubungan genetiknya.

2 Bahan dan Metode
2.1 Desain Penelitian
Pertama, kami memperoleh data GWAS tingkat ringkasan dari basis data yang tersedia untuk umum. Kami kemudian menganalisis korelasi genetik antara berbagai jenis konsumsi kopi dan AMD menggunakan LDSC. Selanjutnya, kami menilai hubungan kausal antara konsumsi kopi dan risiko AMD menggunakan pengacakan Mendelian univariabel (UVMR), menggunakan proses pemilihan data yang ketat dan menggabungkan lima metode MR untuk mengungkap hubungan kausal, dengan analisis sensitivitas yang meningkatkan kredibilitas temuan. Akhirnya, kami mengeksplorasi varian genetik bersama antara berbagai jenis konsumsi kopi dan AMD menggunakan kolokalisasi Bayesian. Dengan mengintegrasikan ketiga pendekatan ini, kami bertujuan untuk menarik kesimpulan yang dapat diandalkan mengenai hubungan antara berbagai jenis konsumsi kopi dan risiko AMD.

2.2 Sumber Data
2.2.1 Data GWAS Konsumsi Kopi
Untuk data konsumsi kopi, kami menggunakan statistik ringkasan dari GWAS tentang konsumsi makanan oleh Pirastu et al. ( 2022 ) yang memiliki deskripsi terperinci tentang kriteria inklusi untuk kopi. Mengikuti metode sebelumnya (Li et al. 2022 ), kami menyamakan konsumsi kopi dengan jumlah asupan kopi. Data ringkasan GWAS yang disertakan untuk konsumsi kopi adalah total konsumsi kopi ( N  = 105.037), konsumsi kopi tanpa kafein ( N  = 62.072), asupan kopi bubuk ( N  = 72.276), dan konsumsi kopi instan ( N  = 180.764) (Tabel 1 ).

TABEL 1. Sumber data GWAS.

Singkatan: AMD, Degenerasi Makula Terkait Usia.

2.2.2 Data GWAS AMD
Kami memperoleh kumpulan data GWAS untuk AMD kering ( N CASE  = 7589, N CONTROL  = 298.486) dan AMD basah ( N CASE  = 5890, N CONTROL  = 300.152) dari data yang tersedia untuk umum yang dirilis oleh konsorsium Finngen (Kurki et al. 2023 ). Untuk AMD kering, kasusnya mencakup individu berusia 50 tahun atau lebih yang didiagnosis oleh dokter. Demikian pula, kriteria inklusi untuk kasus AMD basah adalah individu berusia 50 tahun atau lebih dengan diagnosis yang dikonfirmasi oleh dokter.

2.3 Analisis Data
2.3.1 Korelasi Genetik Seluruh Genom
LDSC digunakan untuk menilai korelasi genetik antara konsumsi kopi dan AMD. SNP dengan frekuensi alel minor (MAF) ≤ 0,01 dikecualikan, dan SNP yang tersisa digunakan untuk analisis lebih lanjut. Selain itu, kami melakukan LDSC bivariat tanpa membatasi intersepsi untuk memperkirakan korelasi genetik ( r g ) antara konsumsi kopi dan AMD. p adj yang dikoreksi BH < 0,05 dianggap sebagai indikasi korelasi yang signifikan. Parameter default digunakan untuk menghitung data referensi berdasarkan populasi Eropa dari Proyek 1000 Genom (Auton et al. 2015 ).

2.3.2 Analisis Randomisasi Mendelian (MR)
Dalam studi ini, kami terutama menggunakan randomisasi Mendelian univariabel (UVMR) untuk memilih variabel instrumental (IV) yang tepat dari SNP dalam ciri paparan (Burgess et al. 2017 ). Kami memilih IV dengan p  < 5 × 10 −8 sebagai ambang batas. Selanjutnya, kami menggunakan data sampel Eropa 1000 Genomes Project sebagai panel referensi, mempertahankan SNP dengan R (Fleckenstein et al. 2024 ) < 0,001 dan ukuran jendela 10.000 kb untuk menghilangkan ketidakseimbangan hubungan (Auton et al. 2015 ). Selain itu, SNP palindromik dikecualikan. Akhirnya, kami menggunakan Uji Steiger dan MR-PRESSO untuk mengecualikan SNP dengan kesalahan arah dan outlier. Data GWAS yang diproses kemudian digunakan untuk analisis UVMR berikutnya. Lima metode MR digunakan untuk memperkirakan efek kausal, dengan model inverse variance weighted (IVW) atau rasio Wald sebagai metode utama untuk penilaian hubungan kausal. Ketika jumlah IV ≥ 2, IVW digunakan sebagai metode utama. Selain itu, metode MR-Egger, Bayesian weighted MR (BWMR), weighted median (WM), dan MR-robust adjusted profile score (MR-RAPS) digunakan untuk meningkatkan kredibilitas hasil (Bowden et al. 2016 ; Zhao, Ming, et al. 2020 ; Zhao, Wang, et al. 2020 ). Idealnya, semua SNP harus valid, tanpa pleiotropi horizontal yang memengaruhi hasil melalui beberapa jalur yang melibatkan varian genetik. Dalam kondisi seperti itu, hasil IVW dianggap andal. Dalam kasus pleiotropi, regresi MR-Egger digunakan untuk memberikan estimasi, dengan hasil MR-Egger diberikan bobot tambahan untuk mengurangi kontribusi outlier (Burgess et al. 2016 ). Uji Q Cochran digunakan untuk menilai heterogenitas yang disebabkan oleh jalur biologis bersama yang melibatkan faktor pengganggu yang tidak terukur terkait dengan paparan dan hasil, dan ketika heterogenitas hadir, hasil IVW efek acak dianggap andal (Xiao et al. 2022 ). Statistik F ( F  = beta 2 /se 2 ) digunakan untuk memperkirakan kekuatan IV; jika statistik F > 10, IV dianggap memiliki korelasi yang cukup kuat dengan paparan untuk memastikan bahwa hasil MR tidak bias oleh instrumen yang lemah (Burgess dan Thompson 2011 ).

2.3.3 Analisis Kolokalisasi Bayesian
Untuk menguji apakah paparan dan hasil berbagi varian kausal di wilayah genom yang sama, kami menggunakan analisis kolokalisasi untuk mengevaluasi lima hipotesis yang saling eksklusif: (1) tidak ada sifat yang memiliki varian kausal (H0); (2) hanya sifat 1 yang memiliki varian kausal (H1); (3) hanya sifat 2 yang memiliki varian kausal (H2); (4) setiap sifat memiliki varian kausal yang berbeda (H3); (5) kedua sifat berbagi varian kausal yang sama (H4). Probabilitas posterior digunakan untuk mengukur bukti untuk setiap hipotesis, yang dinyatakan sebagai PPH0, PPH1, PPH2, PPH3, dan PPH4 (Giambartolomei et al. 2018 ). Kami memilih SNP independen yang signifikan (LD r 2  = 0,001, p  < 5 × 10 −8 ) dari setiap pasangan paparan dan hasil dalam MR, menetapkan jendela hulu dan hilir 500 kb untuk analisis, dan menghitung hasil kolokalisasi akhir sebagai PPH4 rata-rata di semua wilayah. PPH4 > 0,75 menunjukkan kemungkinan varian genetik bersama di wilayah tersebut antara konsumsi kopi dan risiko AMD.

2.4 Analisis Statistik
Semua analisis MR dilakukan menggunakan R (versi 4.4.1).

3 Hasil
3.1 Korelasi Genetik Antara Konsumsi Kopi dan AMD
Hasil analisis LDSC menunjukkan bahwa heritabilitas ( h 2 ) konsumsi kopi, konsumsi kopi tanpa kafein, konsumsi kopi bubuk, konsumsi kopi instan, dan AMD basah, AMD kering masing-masing adalah 0,110, 0,043, 0,059, 0,064, 0,026, dan 0,025. Mungkin tidak ada korelasi genetik yang signifikan antara konsumsi kopi, konsumsi kopi tanpa kafein, dan konsumsi kopi bubuk dengan AMD kering (Tabel 2 ). Konsumsi kopi instan berkorelasi genetik dengan AMD kering, dan setelah koreksi menggunakan metode BH, hasilnya tetap signifikan ( p  = 0,045) (Tabel 2 ). Sebanyak tujuh SNP dipilih untuk analisis MR antara kopi instan dan AMD kering, dan kami menemukan bahwa, setelah koreksi, tidak ada korelasi genetik antara AMD basah dan konsumsi kopi instan ( p  = 0,124) (Tabel 2 ). Untuk menilai potensi tumpang tindih sampel antara data konsumsi kopi dan set data AMD GWAS, kami memeriksa proporsi sampel yang tumpang tindih untuk setiap konsumsi kopi dan subtipe AMD. Seperti yang ditunjukkan dalam (Tabel 3 ), tumpang tindihnya minimal, dengan persentase tumpang tindih berkisar antara 0,4% hingga 1,2% di berbagai jenis kopi dan fenotipe AMD.

TABEL 2. Korelasi genetik ( r _g ) antara sifat konsumsi kopi dan subtipe AMD, dengan nilai p yang disesuaikan dengan FDR.

Singkatan: AMD, degenerasi makula terkait usia; r g ( p adj) , korelasi genetik antara sifat, dan nilai p yang disesuaikan ( p adj) menggunakan metode Benjamini-Hochberg untuk mengendalikan FDR pada beberapa pengujian.

TABEL 3. Tingkat tumpang tindih sampel.

Singkatan: AMD, degenerasi makula terkait usia.

3.2 Analisis UVMR
Dengan menggunakan MR, seperti yang dijelaskan sebelumnya, kami menyelidiki hubungan kausal antara konsumsi kopi dan AMD. Statistik-F semuanya > 10, dengan statistik- F rata-rata untuk setiap pasangan paparan-hasil berkisar dari 47,96 hingga 181,03 (Tabel 4 ). Selain itu, statistik- F spesifik SNP dihitung (Tabel S2 ), yang mengonfirmasi bahwa semua variabel instrumental individual memenuhi kriteria F  > 10, sehingga meminimalkan risiko bias instrumen yang lemah. Analisis sensitivitas menggunakan MR-Egger dan MR-PRESSO lebih lanjut mendukung kekokohan temuan kami. Hasil IVW menunjukkan bahwa hanya konsumsi kopi instan yang memiliki hubungan signifikan secara statistik dengan AMD kering setelah koreksi BH ( p  = 0,006) (Tabel 4 ). Hasil dari semua metode analisis disediakan dalam Tabel S1 . Konsumsi kopi instan yang diprediksi secara genetik ditemukan meningkatkan risiko AMD kering, dengan setiap peningkatan SD dalam konsumsi kopi instan sesuai dengan OR sekitar 6,92 untuk AMD kering, yang menunjukkan peningkatan risiko 6,92 kali lipat. SNP individual yang digunakan dalam analisis UVMR ditunjukkan pada Tabel S2 .

TABEL 4. Hasil analisis MR.

Singkatan: BETA, estimasi ukuran efek; CI, interval kepercayaan; Statistik F , statistik kekuatan instrumen; OR, rasio peluang; p , nilai p ; p adj, nilai p yang disesuaikan ; SE, kesalahan standar; SNP, polimorfisme nukleotida tunggal.

Dalam analisis sensitivitas, uji Q Cochran menunjukkan adanya heterogenitas dalam analisis MR kopi bubuk dengan AMD kering dan basah, serta antara kopi tanpa kafein dan AMD basah. Namun, analisis WM masih menunjukkan tidak ada potensi hubungan kausal. Selain itu, tidak ditemukan heterogenitas antara kopi instan dan AMD kering (Tabel S3 ). Uji intersep tidak menunjukkan adanya pleiotropi dalam analisis MR sebelumnya (Tabel S3 ).

3.3 Analisis Kolokalisasi
Untuk memeriksa apakah paparan dan hasil memiliki varian kausal yang sama di wilayah uji yang sama, kami menerapkan metode coloc untuk analisis kolokalisasi. Pertama, kami memperoleh SNP yang terkait secara independen (Tabel S4 ) dari berbagai kategori konsumsi kopi dan AMD, yang dianggap sebagai SNP utama. SNP ini kemudian digabungkan, dan wilayah dalam jendela hulu dan hilir 500 KB dipilih sebagai wilayah uji untuk analisis. Hasil analisis kolokalisasi menunjukkan bahwa tidak ada wilayah atau varian genetik yang sama antara konsumsi kopi dan AMD (semua PPH4 > 0,75) (Tabel S4 ).

4 Diskusi
Studi ini menyelidiki risiko konsumsi kopi pada AMD secara komprehensif menggunakan data ringkasan GWAS skala besar. Kami menganalisis korelasi genetik, hubungan kausal, dan varian kausal bersama antara konsumsi kopi dan AMD. Hasilnya mengungkapkan hubungan genetik antara konsumsi kopi dan AMD, terutama menunjukkan bahwa kopi instan meningkatkan risiko AMD kering.

Studi kohort sebelumnya menunjukkan bahwa kopi bermanfaat untuk AMD (Chiu et al. 2017 ). Sebaliknya, studi kami memberikan stratifikasi jenis kopi yang lebih rinci dan menghasilkan hasil yang berbeda, yang menunjukkan potensi bias dalam penelitian sebelumnya. Hasil LDSC menunjukkan potensi korelasi genetik antara konsumsi kopi instan dan AMD kering dan basah. Hasil analisis UVMR menunjukkan bahwa konsumsi kopi secara keseluruhan mungkin tidak memiliki hubungan kausal dengan AMD. Menariknya, kami menemukan bahwa kopi instan secara signifikan meningkatkan risiko AMD, dengan setiap peningkatan SD dalam konsumsi kopi instan sesuai dengan OR sekitar 6,92 untuk AMD kering, yang menunjukkan peningkatan risiko 6,92 kali lipat. Analisis komprehensif ini menggunakan berbagai metode mengonfirmasi hubungan genetik yang andal antara konsumsi kopi dan AMD.

Hubungan antara kopi dan kesehatan telah diteliti dengan baik, menunjukkan adanya efek menguntungkan dan merugikan. Laporan sebelumnya menunjukkan bahwa kopi dapat memperbaiki steatosis dan fibrosis hati serta mengurangi risiko kondisi ini (Morisco et al. 2014 ). Selain itu, beberapa penelitian menunjukkan bahwa kopi tanpa kafein, kopi bubuk, dan kopi instan dapat melindungi kesehatan kardiovaskular, mengurangi risiko penyakit jantung koroner, dan bahwa konsumsi berlebihan tidak dikaitkan dengan penyakit kardiovaskular (O’Keefe et al. 2013 ; Ding et al. 2014 ; Chieng et al. 2022 ). Sebagian besar penelitian menunjukkan efek perlindungan kopi. Namun, konsumsi kopi, khususnya, telah dikaitkan dengan peningkatan risiko penyakit mata. Secara khusus, kopi tidak hanya meningkatkan risiko glaukoma sudut terbuka primer tetapi juga meningkatkan risiko katarak terkait usia (Li et al. 2022 ; Yuan et al. 2022 ). Menariknya, kopi tampaknya memiliki dampak signifikan terhadap penyakit terkait usia. Meskipun konsumsi kopi berkorelasi positif dengan umur panjang, konsumsi kopi instan berkorelasi negatif dengan panjang telomer biomarker penuaan (Wei et al. 2023 ; O’Keefe et al. 2018 ). Demikian pula, kami tidak menemukan hubungan kausal antara kopi dan AMD, tetapi potensi hubungan genetik dan kausal antara kopi instan dan AMD. Kami berspekulasi bahwa efek yang berbeda dari berbagai jenis kopi pada AMD mungkin terkait dengan proses manufaktur, aditif, dan faktor-faktor lainnya (Moraes dan Bolini 2010 ; Farah dan Farah 2019 ; Neoh et al. 2016 ). Misalnya, penelitian telah melaporkan bahwa produksi kopi instan dapat menyebabkan pembentukan zat-zat yang berpotensi berbahaya seperti akrilamida dan produk akhir glikasi lanjutan (AGEs), yang telah terlibat dalam stres oksidatif dan respons inflamasi pada sel-sel retina. Kopi instan dibuat dengan menyeduh ekstrak pekat dan kemudian menyemprotkan pengeringan atau mengeringkan cairan; panas dan konsentrasi yang intens ini menghasilkan produk sampingan reaksi Maillard tingkat tinggi dan sering kali melibatkan bahan tambahan (misalnya, gula, krimer). Jenis kopi lain tidak memiliki aditif serupa. Proses produksinya juga menghasilkan AGE yang relatif sedikit. Survei kimia kopi instan menunjukkan peningkatan racun “neo-formed” yang nyata (Zhang et al. 2023 ; Moore et al. 2003AGE mengaktifkan beberapa jalur pensinyalan, termasuk jalur faktor-κB nuklir (NF-κB), faktor pertumbuhan transformasi-β (TGF-β), Jak–STAT, dan PI3K-Akt, dengan mengikat reseptornya RAGE, yang menyebabkan perubahan patologis seperti peradangan, apoptosis, dan angiogenesis. Selain itu, akumulasi AGE menginduksi produksi spesies oksigen reaktif (ROS), yang mengganggu keseimbangan redoks sel retina dan selanjutnya memperburuk stres oksidatif dan respons peradangan. AGE juga meningkatkan aktivitas pengikatan DNA NF-κB dan ekspresi molekul adhesi antarsel 1 (ICAM-1) dengan berinteraksi dengan RAGE, yang meningkatkan adhesi leukosit ke sel endotel retina, yang menyebabkan gangguan pada sawar darah-retina (Kang et al. 2022 ).

Studi terkini menunjukkan bahwa analisis ko-lokalisasi tidak mengidentifikasi wilayah genetik atau varian yang sama antara asupan kopi dan AMD, yang menunjukkan bahwa efek kausal kopi instan pada risiko AMD kering mungkin tidak didorong oleh satu varian genetik, tetapi melibatkan berbagai mekanisme biologis yang kompleks, termasuk efek regulasi poligenik, interaksi gen-lingkungan, dan modifikasi epigenetik. Meskipun analisis MR yang signifikan mendukung hubungan kausal antara kopi instan dan AMD kering, efeknya tidak dapat dikaitkan dengan jelas ke satu varian dalam analisis ko-lokalisasi, yang mengarah pada hipotesis bahwa kopi instan dapat secara komprehensif mengatur proses biologis yang terkait dengan AMD melalui beberapa faktor genetik yang berinteraksi dengan lingkungan dan memengaruhi modifikasi epigenetik. Selain itu, efek kopi instan mungkin juga sebagian disebabkan oleh peradangan dan stres oksidatif yang disebabkan oleh bahan kimia berbahaya yang diproduksi selama produksinya. Studi mendatang perlu mensintesis mekanisme kompleks ini dari berbagai perspektif untuk lebih mengungkap hubungan intrinsik antara kopi instan dan AMD kering, dan memberikan dasar teoritis yang lebih komprehensif untuk pencegahan dan intervensi penyakit.

Studi ini memberikan panduan mengenai konsumsi kopi instan, yang menunjukkan bahwa kopi instan meningkatkan risiko AMD kering, dan oleh karena itu kelompok berisiko tinggi harus mengurangi asupannya. Lebih jauh, penting untuk mengidentifikasi komponen berbahaya dalam kopi instan dan jenis kopi lainnya untuk mengurangi kandungannya. Mengeksplorasi mekanisme efek kopi instan pada AMD menggunakan model hewan juga diperlukan. Selain itu, analisis lebih lanjut tentang hubungan genetik antara kopi instan dan penyakit lainnya diperlukan untuk memahami dampak kopi yang lebih luas terhadap kesehatan.

5 Kekuatan dan Keterbatasan
Kami menggabungkan analisis korelasi genetik dan inferensi kausal untuk menyelidiki hubungan genetik antara konsumsi kopi dan AMD, yang memungkinkan suplementasi bersama untuk menghindari bias yang disebabkan oleh penggunaan satu metode. Lebih jauh, kami memanfaatkan data AMD terkini, yang memberikan analisis yang lebih akurat dan objektif tentang hubungan antara konsumsi kopi dan AMD.

Akan tetapi, penelitian kami memiliki beberapa keterbatasan. Pertama, meskipun terdapat beberapa sampel yang tumpang tindih yang sangat rendah dan kami menggunakan beberapa metode untuk mengatasinya, potensi bias tidak dapat sepenuhnya dikesampingkan. Kedua, karena kurangnya data individual, kami tidak melakukan analisis MR nonlinier pada hubungan antara konsumsi kopi dan risiko AMD. Ketiga, analisis kami terbatas pada populasi Eropa, dan penelitian selanjutnya harus mempertimbangkan untuk menyertakan populasi yang lebih beragam. Terakhir, klasifikasi konsumsi kopi kami tidak cukup rinci, dan penelitian selanjutnya harus mempertimbangkan klasifikasi yang lebih baik, seperti “kopi panggang gelap” atau “kopi panggang sedang,” yang dapat mengungkap lebih banyak potensi risiko yang terkait dengan AMD.

6 Kesimpulan
Kopi instan dapat meningkatkan risiko AMD, dan mengurangi asupan kopi instan dapat mencegah AMD kering. Orang yang berisiko tinggi mengalami AMD sebaiknya menghindari asupan kopi instan.