Abstrak
Menyusul permintaan dari Komisi Eropa, Panel EFSA tentang Nutrisi, Makanan Baru, dan Alergen Makanan (NDA) diminta untuk menyampaikan pendapat tentang Clostridium butyricum TO-A sebagai makanan baru (NF) sesuai dengan Peraturan (UE) 2015/2283. NF, yang diusulkan oleh pemohon untuk digunakan sebagai suplemen makanan, cukup berkarakter. Informasi yang diberikan tentang proses produksi, komposisi, stabilitas, dan spesifikasi NF cukup dan tidak menimbulkan masalah keamanan. Berdasarkan temuan studi toksisitas oral dosis berulang selama 90 hari pada tikus, dan mempertimbangkan faktor ketidakpastian sebesar 200, Panel memperkirakan dosis aman pada manusia sebesar 4,5 × 106 unit pembentuk koloni (CFU)/kg berat badan (bb) per hari. Namun, dengan mempertimbangkan bahwa kolonisasi bakteri awal yang tepat pada saluran pencernaan manusia, khususnya selama 3 tahun pertama kehidupan, sangat memengaruhi kesehatan selama masa bayi dan kanak-kanak, bahwa gangguan pada mikrobiota di awal kehidupan dapat memiliki dampak kesehatan yang bertahan lama hingga dewasa, dan dengan mempertimbangkan bahwa studi toksisitas oral 90 hari dilakukan pada tikus dewasa, Panel berpendapat bahwa populasi sasaran untuk NF harus dibatasi pada anak-anak di atas usia 3 tahun, remaja dan orang dewasa, tidak termasuk wanita hamil dan menyusui. Panel menyimpulkan bahwa NF, C. butyricum TO-A, aman pada 1,0 × 108 CFU /hari untuk anak-anak lain (3 hingga < 10 tahun), 2,0 × 108 CFU /hari untuk remaja berusia 10 hingga < 14 tahun, 2,8 × 108 CFU /hari untuk remaja berusia 14 hingga < 18 tahun dan 3,2 × 108 CFU /hari untuk orang dewasa, tidak termasuk wanita hamil dan menyusui.

1. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang dan Kerangka Acuan sebagaimana diberikan oleh pemohon
Pada tanggal 10 November 2021, perusahaan ‘TOA Biopharma Co. Ltd.’ mengajukan permohonan kepada Komisi Eropa sesuai dengan Pasal 10 Peraturan (UE) 2015/2283 untuk mengizinkan penempatan di pasar Uni Clostridium butyricum TO-A sebagai makanan baru (NF).

Pemohon meminta izin penggunaan Clostridium butyricum TO-A sebagai NF dalam suplemen makanan sebagaimana didefinisikan dalam Arahan 2002/46/EC, tidak termasuk bayi di bawah usia 3 bulan.

Pemohon telah meminta perlindungan data berdasarkan Pasal 26 Peraturan (UE) 2015/2283.

Sesuai dengan Pasal 10(3) Peraturan (UE) 2015/2283, Komisi Eropa meminta EFSA untuk memberikan pendapat ilmiah tentang Clostridium butyricum TO-A.

Dalam pendapat tentang Clostridium butyricum TO-A ini, EFSA juga harus mendokumentasikan apakah dan sejauh mana persyaratan Pasal 26(2)(c) Peraturan (UE) 2015/2283 dipenuhi terkait data yang dimintakan perlindungan datanya oleh pemohon.

1.2 Informasi tambahan
Pada tahun 2020, Clostridium ( C .) butyricum telah dilaporkan kepada Panel Bahaya Biologis EFSA (BIOHAZ) untuk penilaian praduga keamanan yang memenuhi syarat (QPS). Panel BIOHAZ tidak merekomendasikan C. butyricum untuk status QPS karena beberapa galur mengandung faktor patogenisitas. Dengan demikian, Panel BIOHAZ mengecualikan spesies ini untuk evaluasi QPS lebih lanjut (Panel BIOHAZ EFSA, 2020 ). Kesimpulan ini dikonfirmasi oleh Panel BIOHAZ pada tahun 2022 (Panel BIOHAZ EFSA, 2022 ).

Pada tahun 2022, Panel EFSA tentang Aditif dan Produk atau Zat yang Digunakan dalam Pakan Hewan (FEEDAP) menilai aditif pakan BIO-THREE®, yang didasarkan pada sel/spora yang hidup dari kombinasi tiga bakteri termasuk NF, yaitu Clostridium butyricum TO-A (FERM BP-10866), ditambah Bacillus subtilis FERM BP-07462 dan Enterococcus lactis FERM BP-10867. Panel FEEDAP menyimpulkan bahwa BIO-THREE® aman untuk spesies target (ayam, kalkun, semua spesies unggas) berdasarkan ketentuan penggunaan yang diusulkan. Panel juga menyimpulkan bahwa aditif tersebut aman bagi konsumen produk yang berasal dari hewan yang menerima aditif tersebut (Panel EFSA FEEDAP, 2022 ). Setelah penilaian tersebut, aditif pakan tersebut disahkan oleh Peraturan Pelaksanaan Komisi (UE) 2024/2185. 1

Pada tahun 2014, strain C. butyricum lainnya , yaitu C. butyricum (CBM 588) (juga disebut sebagai C. butyricum MIYAIRI 588 (CBM 588)), telah diberi izin untuk dipasarkan sebagai suplemen makanan pada 1,35 × 108 CFU /hari di Uni Eropa sebagai NF berdasarkan Keputusan Pelaksanaan Komisi 2014/907/UE. 2 Oleh karena itu, C. butyricum (CBM 588) juga dimasukkan dalam daftar makanan baru Uni Eropa. 3

2 DATA DAN METODOLOGI
2.1 Data
Penilaian keamanan NF ini didasarkan pada data yang diberikan dalam aplikasi dan informasi yang disampaikan oleh pemohon setelah EFSA meminta informasi tambahan. 4

Persyaratan administratif dan ilmiah untuk aplikasi NF sebagaimana dimaksud dalam Pasal 10 Peraturan (UE) 2015/2283 tercantum dalam Peraturan Pelaksanaan Komisi (UE) 2017/2469. 5

Format umum dan terstruktur mengenai penyajian aplikasi NF dijelaskan dalam panduan EFSA tentang persiapan dan penyajian aplikasi NF (Panel NDA EFSA, 2021 ). Sebagaimana ditunjukkan dalam panduan ini, pemohon berkewajiban untuk menyediakan semua data ilmiah yang tersedia (milik sendiri, rahasia, dan yang dipublikasikan) (termasuk data yang mendukung dan tidak mendukung) yang berkaitan dengan keamanan NF.

Pemohon menyampaikan versi berkas yang rahasia dan tidak rahasia dengan mengikuti panduan EFSA tentang penyiapan dan penyajian aplikasi NF (Panel NDA EFSA, 2021 ) dan panduan administratif untuk penyiapan aplikasi pada makanan baru sesuai dengan Pasal 10 Peraturan (UE) 2015/2283 (EFSA, 2021 ).

Sesuai dengan Pasal 38 Peraturan (EC) No 178/2002 6 dan dengan mempertimbangkan perlindungan informasi rahasia dan data pribadi sesuai dengan Pasal 39 hingga 39e Peraturan yang sama, dan Keputusan Direktur Eksekutif EFSA yang menetapkan pengaturan praktis mengenai transparansi dan kerahasiaan, 7 versi non-rahasia dari berkas tersebut telah dipublikasikan di Open.EFSA. 8

Sesuai dengan Pasal 32c(2) Peraturan (EC) No 178/2002 dan Keputusan Direktur Eksekutif EFSA yang menetapkan pengaturan praktis mengenai fase pra-penyerahan dan konsultasi publik, EFSA melaksanakan konsultasi publik (PC-0430) 9 pada versi non-rahasia dari berkas teknis tersebut dari 05/04/2023 hingga 26/04/2023 yang tidak menerima komentar apa pun.

Aplikasi NF ini mencakup permintaan perlindungan data kepemilikan, sesuai dengan Pasal 26 Peraturan (UE) 2015/2283. Data yang diminta oleh pemohon untuk dilindungi meliputi:

• Lampiran_I_2_1_1_Proses_manufaktur.
• Lampiran_l_3_1_1_Analisis_nutrisi (bagian 1–5).
• Lampiran_l_3_1_2_ Analisis C butyricum (bagian 1–5).
• Lampiran_l_3_1_3_Kemurnian (bagian 1–5).
• Lampiran_l_9_2_1_AMES.
• Lampiran_l_9_2_2_Mikronukleasi.
• Lampiran_l_9_2_3_Ames_supernatan.
• Lampiran_l_9_2_4_Supernatan mikronukleus.
• Lampiran_l_9_2_5_in_vivo_mikronukleus_komet_supernatan.
• Lampiran_l_9_2_6_Efisiensi Lisis_Perancis.
• Lampiran_l_9_2_6_Lampiran1_SEM_gambar.
• Lampiran_l_9_2_7_Ames_Lysate.
• Lampiran_l_9 _2_8_Mikronukleus_Lisat.
• Lampiran_l_9_3_Toksisitas_subkronis.

2.2 Metodologi
Penilaian ini mengikuti metodologi yang ditetapkan dalam panduan EFSA tentang aplikasi NF (Panel NDA EFSA, 2021 ) dan prinsip-prinsip yang dijelaskan dalam dokumen panduan relevan yang ada dari Komite Ilmiah EFSA. Ketentuan hukum untuk penilaian ditetapkan dalam Pasal 11 Peraturan (UE) 2015/2283 dan dalam Pasal 7 Peraturan Pelaksanaan Komisi (UE) 2017/2469.

Penilaian ini hanya menyangkut risiko yang mungkin terkait dengan konsumsi NF berdasarkan kondisi penggunaan yang diusulkan, dan bukan merupakan penilaian atas kemanjuran NF sehubungan dengan manfaat yang diklaim.

3 PENILAIAN
3.1 Pendahuluan
Bakteri NF yang menjadi subjek aplikasi adalah Clostridium butyricum TO-A. Bakteri NF diproduksi melalui fermentasi anaerobik. Biomassa dipisahkan melalui sentrifugasi, dikeringkan, dan dicampur dengan pati kentang. Bakteri NF diusulkan untuk digunakan dalam suplemen makanan (sebagaimana didefinisikan dalam Petunjuk 2002/46/EC). Populasi sasaran yang diusulkan oleh pemohon adalah populasi umum, tidak termasuk bayi di bawah usia 3 bulan.

NF diatur dalam Pasal 3(2)(a)(ii) yaitu pangan yang terdiri dari, diisolasi dari atau diproduksi dari mikroorganisme, jamur atau alga, sebagaimana didefinisikan dalam Peraturan (UE) 2015/2283.

3.2 Identitas NF
NF adalah C. butyricum TO-A kering, yang merupakan pembentuk spora, anaerobik ketat dan termasuk dalam genus Clostridium Gram-positif .

C. butyricum TO-A awalnya diisolasi dari usus manusia yang sehat. Ketika ditumbuhkan secara anaerobik pada suhu 37°C dalam agar sulfit besi selama 24 jam, koloni hitam melingkar dari C. butyricum TO-A akan muncul. Pewarnaan Gram menunjukkan sel berbentuk batang lurus atau sedikit melengkung dan spora berbentuk oval.

Pemohon diminta untuk menjelaskan sifat NF, dan khususnya, persentase sel dan spora. Sebagai balasan, pemohon memberikan analisis sel dan spora untuk lima kelompok NF, yang menunjukkan bahwa NF merupakan campuran spora dan sel vegetatif dengan sekitar 85% (kisaran: 74%–89%) spora.

Klasifikasi taksonomi lengkap dari strain yang digunakan adalah sebagai berikut: Domain: Bakteri; Filum: Firmicutes; Kelas: Clostridia; Ordo: Clostridiales; Famili: Clostridialaceae; Genus: Clostridium ; Spesies: Clostridium butyricum ; Galur: Clostridium butyricum TO-A. Pemohon mencantumkan pengenal internal C. butyricum TO-A sebagai berikut: Clostridium, Clostridium TO-A, CB TO-A, Clostridium butyricum , CB, CBT.

Strain ini disimpan dengan nomor FERM BP-10866 di Institut Teknologi dan Evaluasi Nasional Jepang, yang mengikuti Perjanjian Budapest tentang Pengakuan Internasional atas Penyimpanan Mikroorganisme. Sertifikat penyimpanan diberikan oleh pemohon.

Genom lengkap C. butyricum TO-A dan dua plasmidnya pCBTOA1 dan pCBTOA2 diurutkan, dan urutan genom lengkap (WGS) disediakan. Organisasi genom secara keseluruhan ditentukan berdasarkan penyelarasan WGS dengan genom C. butyricum yang telah dirakit di NCBI GenBank. Urutan yang disediakan menghasilkan genom yang hampir lengkap yang termasuk dalam spesies bakteri ini.

Identifikasi taksonomis galur TO-A sebagai C. butyricum ditetapkan dengan alat penyelarasan dan non-penyelarasan untuk data WGS. Analisis gen 16S rRNA dan perhitungan berbasis penyelarasan identitas nukleotida rata-rata (ANI) menetapkan galur tersebut ke spesies Clostridium butyricum , dengan ANI 99,99 dengan tipe galur C. butyricum KNU-L09 T. Demikian pula, pohon filogenetik berdasarkan penyelarasan gen inti mengelompokkan galur uji bersama dengan C. butyricum KNU-L09 T. Berdasarkan hasil ini, identifikasi taksonomis galur tersebut dikonfirmasi sebagai Clostridium butyricum .

Data WGS memungkinkan penilaian keberadaan gen resistensi antimikroba dan potensi toksin serta faktor virulensi. Penyaringan genom galur mengungkapkan bahwa tidak ada gen resistensi antimikroba putatif di atas 80% identitas dan 70% cakupan yang ada (basis data Gen Referensi Resistensi Antimikroba Bakteri NCBI dan basis data ResFinder). Resistensi fenotipik galur uji dinilai menurut nilai batas EFSA untuk bakteri Gram-positif (Panel EFSA FEEDAP, 2018 ). Pengujian fenotipik kerentanan antimikroba menunjukkan bahwa galur tersebut resisten terhadap aminoglikosida gentamisin, kanamisin, dan streptomisin. Konsentrasi penghambatan minimum untuk kanamisin dan streptomisin adalah 128 mg/L dibandingkan dengan nilai batas yang ditetapkan oleh Panel EFSA FEEDAP pada tahun 2018 (masing-masing 16 mg/L untuk kanamisin dan 8 mg/L untuk streptomisin). Namun, resistensi fenotipik ini bersifat intrinsik pada spesies ini dan anaerob secara umum (Panel EFSA FEEDAP, 2009 , 2014 ; Isa et al., 2016 ) dan tidak ada transfer gen horizontal yang diharapkan.

Faktor virulensi utama Clostridium spp. patogenik (yaitu C. botulinum, C. difficile, C. tetani dan C. perfringens ) meliputi toksin α, β dan ε dan neurotoksin yang sangat kuat (BONT/AG) dan dapat ditemukan pada spesies Clostridium lainnya . Akan tetapi, menurut interogasi yang dilakukan dengan WGS C. butyricum TO-A terhadap basis data faktor virulensi (VFDB; set lengkap, diakses pada 14/07/2021), gen untuk toksin spesifik ini atau (neuro)toksin lainnya tidak ada. Tiga faktor ditemukan dalam database (dengan persentase identitas yang berbeda), yaitu chaperonin GroEL (VFG012102: WP_011967678), RNA methyltransferase (VFG012183: WP_011969031.1) dan protein aksesori urease UreG (VFG019533: WP_000238754.1), yang semuanya merupakan gen yang terkait dengan fungsi seluler normal pada bakteri.

Panel berpendapat bahwa NF cukup terkarakterisasi dan tidak menimbulkan masalah keselamatan.

3.3 Proses produksi
Berdasarkan informasi yang diberikan, NF diproduksi sesuai dengan praktik produksi yang baik (GMP) dan prinsip Hazard Analysis Critical Control Points (HACCP).

Bagan alir proses produksi dan informasi terperinci mengenai kondisi kultur dan media bersama dengan metode kendali mutu yang terlibat pada setiap langkah disediakan (informasi rahasia).

Langkah pertama dari proses ini adalah pembudidayaan dan pemanenan C. butyricum . Awalnya, inokulum C. butyricum TO-A disiapkan dari alikuot kultur yang disimpan pada suhu -80°C. Langkah-langkah subkultur berturut-turut dalam media cair dengan volume yang meningkat dilakukan untuk menyiapkan inokulasi fermentor utama. Fermentasi utama dilakukan dalam kondisi anaerobik yang ketat pada suhu dan pH tertentu (informasi rahasia) dan morfologi mikroskopisnya dikonfirmasi. Pemisahan biomassa dicapai dengan sentrifugasi pada kecepatan tertentu (informasi rahasia).

Sel-sel dikeringkan dengan cara disemprotkan hingga menjadi bubuk dan dicampur dengan pati kentang untuk mencapai konsentrasi C. butyricum TO-A yang diinginkan. Penghitungan sel, uji mikrobiologi dan kemurnian serta pemeriksaan visual kualitatif terhadap bubuk dilakukan. Produk akhir dikemas sesuai skala dan disimpan dalam kondisi tertentu (informasi rahasia).

Pemohon diminta untuk memberikan informasi lebih lanjut tentang pati kentang, misalnya jika ada jenis pati kentang tertentu yang digunakan (misalnya pati resistan), yang akan mendukung kelangsungan hidup spora/sel C. butyricum TO-A di saluran pencernaan, atau jika beberapa jenis enkapsulasi diterapkan. Dalam jawabannya, pemohon menyatakan bahwa pati resistan maupun bentuk enkapsulasi apa pun tidak digunakan. Menurut pemohon, tujuan utama pati kentang adalah ‘untuk menstabilkan spora dengan menjaga lingkungan tetap kering’.

Panel berpendapat bahwa proses produksi telah dijelaskan secara memadai dan tidak menimbulkan masalah keselamatan.

3.4 Data komposisi
NF, C. butyricum TO-A kering, termasuk pati kentang, terdiri dari karbohidrat (~96%), kelembaban (~1,7%), serat makanan (~1,5%), protein (~0,6%) dan sedikit lemak (<0,2%).

Untuk memastikan bahwa proses manufaktur dapat direproduksi dan memadai untuk menghasilkan produk dengan karakteristik tertentu dalam skala komersial, pemohon memberikan informasi analitis untuk lima lot NF yang independen (Tabel 1 ).

TABEL 1. Analisis NF dari batch ke batch.

Singkatan: AOAC, Asosiasi Kolaborasi Analisis Resmi; APC, hitungan lempeng mesofilik aerobik; CFU, unit pembentuk koloni; EC, Komisi Eropa; EN, Standar Eropa; nd, tidak terdeteksi; HPLC, kromatografi cair kinerja tinggi; ICP-OES, Spektroskopi Emisi Optik Plasma yang Digabungkan Secara Induktif; rRNA, asam ribonukleat ribosom; UNE, badan standardisasi Spanyol; WGS, sekuens genom utuh.
a Panel mencatat bahwa 'serat makanan' mengacu pada polisakarida yang tidak dapat dicerna.

Selain analisis proksimat, pemohon memberikan analisis terperinci mengenai asam lemak, yang semuanya berada di bawah batas kuantifikasi (LOQ = 0,01 g/100 g). Analisis pestisida, mikotoksin dan aflatoksin, dioksin dan PCB dalam NF juga diberikan. Tidak ada residu pestisida, mikotoksin dan aflatoksin ini yang terdeteksi di atas LOQ atau batas deteksi masing-masing sebagaimana ditunjukkan oleh hasil analisis yang diberikan.

Analisis silikon (Si) dilakukan untuk mendeteksi residu berbasis silikon dari agen antibusa (yaitu dimetil polisiloksan (E 900)) yang digunakan selama proses pembuatan, dan kadar 18–19 mg/kg Si terdeteksi. Jumlah ini sesuai dengan sekitar 50 mg agen antibusa (yaitu dimetil polisiloksan (E 900)). Mempertimbangkan asupan maksimum NF yang diusulkan, yang dapat mencapai hingga 1 g NF/hari (lihat Tabel 3 ), asupan harian dimetil polisiloksan adalah 50 μg (setara dengan 0,7 μg/kg bb per hari untuk orang dewasa). Mempertimbangkan ADI untuk dimetil polisiloksan sebesar 17 mg/kg bb per hari yang ditetapkan pada tahun 2020 (Panel EFSA FAF, 2020 ), Panel menganggap bahwa hal ini tidak menimbulkan masalah keamanan.

Informasi diberikan tentang akreditasi laboratorium yang melakukan analisis yang disajikan dalam aplikasi.

Panel beranggapan bahwa informasi yang diberikan mengenai komposisi tersebut cukup untuk mengkarakterisasi NF.

3.4.1 Stabilitas
Pemohon melakukan uji stabilitas dengan lima batch NF yang diproduksi secara independen. Pengujian dilakukan pada kondisi penyimpanan normal pada suhu 25°C di tempat kering (<60% kelembaban relatif (RH)) selama 25 bulan. Batch tersebut dianalisis untuk mengetahui kontaminan mikroba dan karakteristik fisikokimia.

Semua bets setelah 25 bulan penyimpanan tampak padat dalam bentuk bubuk homogen putih halus. Kandungan CFU dalam NF menurun dari rata-rata 3,8 × 109 CFU /g pada awal periode penyimpanan menjadi rata-rata 1,7 × 109 CFU /g setelah 25 bulan. Kadar air dan zat volatil (%) meningkat dari 1% menjadi sekitar 2,4%. Parameter mikroba yang dianalisis (ragi, jamur, jumlah total mikroba aerobik (TAMC), Salmonella spp., total coliform) tetap dalam batas yang ditetapkan dalam spesifikasi. Berdasarkan hasil ini, pemohon mengusulkan masa simpan NF selama 25 bulan.

Panel berpendapat bahwa data memberikan informasi yang cukup mengenai stabilitas NF.

3.5 Spesifikasi
Spesifikasi NF, seperti yang diusulkan pemohon, ditunjukkan pada Tabel 2 .

TABEL 2. Spesifikasi NF.

 

Parameter	Spesifikasi
C.butyricum TO-A (C.butyricum)	1–7 × 109 CFU /gram
Kelembaban	< 5%
Bakteri koliform	< 10 CFU/gram
TAM	≤ 1 × 103 CFU /gram
TYMC	≤ 1 × 10 2 CFU/gram
Salmonella spp.	Tidak terdeteksi dalam 25 g

Singkatan: CFU, unit pembentuk koloni; TAMC, jumlah total mikroba aerobik; TYMC, jumlah total ragi dan jamur.

Panel beranggapan bahwa informasi yang diberikan mengenai spesifikasi NF sudah memadai dan tidak menimbulkan masalah keselamatan.

3.6 Sejarah penggunaan NF dan/atau sumbernya
3.6.1 Sejarah penggunaan sumber
C. butyricum dilaporkan digunakan secara luas di Asia, khususnya di Jepang, Korea, dan Cina (Vos et al., 2009 ). C. butyricum ditemukan di banyak lingkungan, termasuk sayuran, susu asam, dan keju (Cassir et al., 2016 ).

3.6.2 Sejarah penggunaan NF
C. butyricum TO-A telah dipasarkan untuk manusia sebagai bagian dari kombinasi tiga bakteri (yaitu BIO-THREE®) di Cina, Taiwan, dan Jepang selama beberapa dekade.

BIO-THREE® (termasuk C. butyricum TO-A) dinilai sebagai aditif pakan oleh Panel FEEDAP EFSA pada tahun 2022. Panel FEEDAP menyimpulkan bahwa BIO-THREE® aman untuk spesies sasaran (ayam, kalkun, semua spesies unggas) berdasarkan ketentuan penggunaan yang diusulkan. Panel juga menyimpulkan bahwa aditif tersebut aman bagi konsumen produk yang berasal dari hewan yang menerima aditif tersebut (Panel FEEDAP EFSA, 2022 ). Setelah penilaian tersebut, BIO-THREE®, yang mencakup C. butyricum TO-A, disahkan sebagai aditif pakan oleh Peraturan Pelaksanaan Komisi (UE) 2024/2185. 10

3.7 Usulan penggunaan dan tingkat penggunaan
3.7.1 Populasi sasaran
Populasi sasaran yang diusulkan oleh pemohon adalah anak-anak berusia 3 bulan ke atas, remaja, dan orang dewasa.

3.7.2 Usulan penggunaan dan tingkat penggunaan
Pemohon bermaksud memasarkan NF sebagai suplemen makanan. Dosis maksimum yang diusulkan per hari, yang berkisar dari 1 × 108 CFU /hari untuk bayi hingga 1 × 109 CFU /hari untuk orang dewasa, serta jumlah maksimum NF dalam mg per hari, ditunjukkan dalam Tabel 3 .

TABEL 3. Usulan penggunaan NF sebagai suplemen makanan pada berbagai kelompok populasi.

Singkatan: CFU, unit pembentuk koloni.

3.8 Penyerapan, distribusi, metabolisme dan ekskresi (ADME)
Tidak ada data ADME yang disediakan untuk NF.

Pemohon menyatakan bahwa NF, yang terdiri dari mikroorganisme hidup, diharapkan dapat melewati saluran pencernaan tanpa diserap dan oleh karena itu studi ADME dengan NF tidak dianggap perlu.

Pemohon mengajukan penelitian yang dilakukan dengan strain C. butyricum lain , yaitu CBM588 (Sato & Tanaka, 1997 ). Setelah pemberian tunggal 107 spora C. butyricum CBM588 kepada tikus, jumlah sel C. butyricum CBM588 dalam isi usus dihitung. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa spora C. butyricum yang diberikan berkecambah di usus halus bagian atas, tumbuh terutama dari usus halus distal ke usus besar dan dikeluarkan dari usus tikus dalam waktu 3 hari (Sato & Tanaka, 1997 ).

3.9 Informasi gizi
Pemohon memberikan analisis nutrisi NF sebagaimana yang dimaksudkan untuk dipasarkan (yaitu termasuk pati kentang). Menurut analisis ini, NF sebagian besar terdiri dari karbohidrat (95%–96%) dengan jumlah protein yang sedikit (sekitar 0,6%) dan lemak (di bawah 0,2%).

Panel berpendapat bahwa, dengan mempertimbangkan komposisi NF dan kondisi penggunaan yang diusulkan, konsumsi NF tidak merugikan secara gizi.

3.10 Informasi Toksikologi
Pemohon menyediakan sembilan studi toksikologi, yang dilakukan dengan C. butyricum TO-A yang dilisiskan (tanpa pati kentang), kultur supernatan NF (yaitu yang berasal dari proses pembuatan NF) dan BIO-THREE®, masing-masing. Dengan pengecualian studi subakut (Sakamaki et al., 1989 ), studi dilakukan sesuai dengan prinsip praktik laboratorium yang baik (GLP) (OECD, 1998 ) dan mengikuti pedoman pengujian masing-masing (OECD, 1997 , 2010 , 2016a , 2016b ) dan Kementerian Kesehatan dan Kesejahteraan (Jepang). Studi, yang diklaim sebagai hak milik oleh pemohon, tercantum dalam Tabel 4 .

TABEL 4. Daftar studi toksikologi yang disediakan.

Singkatan: bw, berat tubuh; DMSO, dimetilsulfoksida; GLP, Praktik Laboratorium yang Baik; OECD, Organisasi untuk Kerja Sama dan Pembangunan Ekonomi; TG, Pedoman Pengujian.

3.10.1 Genotoksisitas
Awalnya pemohon melakukan pengujian genotoksisitas dengan menggunakan suplemen makanan BIO-THREE® sebagai bahan uji, yang meliputi NF, yaitu C. butyricum TO-A (pada 1 × 108 CFU /g), tetapi juga mengandung B. subtilis TO-A (pada 1 × 108 CFU /g) dan E. faecium T-110 (pada 1 × 109 CFU /g).

Uji mutasi balik bakteri (Tidak dipublikasikan, 2018a ) dilakukan dengan lima galur Salmonella typhimurium (TA1535, TA1537, TA98, TA100 dan TA102), baik dengan dan tanpa aktivasi metabolik, dalam dua pengujian independen (yang kedua menurut protokol pra-inkubasi). Item uji (BIO-THREE®) digunakan dalam bentuk ekstrak dimetilsulfoksida (DMSO) pada 2 g/mL (yaitu 2,4 × 109 CFU /mL). Volume dosis teratas adalah 100 dan 50 μL/piring ekstrak DMSO dalam kondisi tanpa dan dengan pra-inkubasi, masing-masing. Tidak ada peningkatan jumlah revertan yang dicatat dengan galur apa pun dalam kondisi apa pun.

Dalam uji mikronukleus sel mamalia in vitro (Tidak dipublikasikan, 2018b ), aktivitas genotoksis BIO-THREE® dinilai dalam sel manusia limfoblastoid TK6 menggunakan ekstrak DMSO pada 2 g/mL (yaitu 2,4 × 109 CFU /mL). Konsentrasi teratas yang diuji adalah 1% ekstrak DMSO. Dua konsentrasi yang lebih rendah (0,5 dan 0,25%) juga dianalisis. Setelah uji sitotoksisitas pendahuluan, uji genotoksisitas dilakukan menggunakan pengobatan jangka pendek 3 jam dengan dan tanpa aktivasi metabolik, diikuti oleh periode pemulihan dan pengobatan berkelanjutan selama 27 jam tanpa aktivasi metabolik dan tanpa periode pemulihan. BIO-THREE® tidak menyebabkan peningkatan yang signifikan secara statistik atau biologis dalam jumlah sel berinti mikro dalam kondisi apa pun.

Menyusul permintaan EFSA untuk pengujian genotoksisitas tambahan pada NF, baik untuk lisat NF maupun kultur supernatan (dalam pengujian terpisah), pemohon mengajukan penelitian seperti yang dijelaskan di bawah ini. Untuk lisis NF (setelah menghilangkan pati kentang melalui 4 langkah pencucian), French Press digunakan, dan kemanjuran lisis dinilai dengan mikroskop elektron pemindaian (SEM). Lisis dilakukan tanpa menggunakan penyangga lisis yang dapat mengganggu sistem pengujian genotoksisitas. Setelah empat siklus pengepresan pada 2700 bar, persentase lisis mencapai 84,78%, yang dianggap memuaskan. Informasi tentang proses ini dan dokumentasi tingkat lisis diberikan oleh pemohon.

Uji mutasi balik bakteri dengan lisat sel NF dilakukan dengan lima galur Salmonella typhimurium (TA1535, TA1537, TA98, TA100 dan TA102), diuji dengan dan tanpa aktivasi metabolik dalam dua uji independen (Tidak dipublikasikan, 2024a ). Volume dosis 100 μL lisat sel/plat digunakan, bukan 5 μL/plat seperti yang direkomendasikan untuk cairan oleh pedoman uji OECD. Pemohon menjelaskan bahwa ini adalah kompromi antara volume perlakuan yang digunakan untuk meningkatkan kadar setiap komponen lisat dan volume lisat yang secara teknis dapat disiapkan dengan French Press. Tidak ada peningkatan jumlah revertan dengan galur apa pun dalam kondisi apa pun.

Lisat sel NF juga diuji dalam uji mikronukleus sel mamalia in vitro (Tidak dipublikasikan, 2024b ). Untuk pengujian tersebut, sel manusia limfoblastoid TK6 diobati dengan lisat sel hingga 10%, konsentrasi maksimum yang kompatibel dengan sistem. Konsentrasi yang lebih rendah sebesar 2,5% dan 5% juga dinilai. Perawatan jangka pendek dilakukan selama 3 jam dengan dan tanpa aktivasi metabolik ditambah periode pemulihan 24 jam. Perawatan jangka panjang dilakukan tanpa aktivasi metabolik dan berlangsung selama 27 jam (tidak ada periode pemulihan yang diterapkan). Tidak ada peningkatan yang signifikan secara statistik dalam jumlah sel bermikronukleus dalam kondisi apa pun.

Seperti yang diminta oleh EFSA, pemohon juga menguji kultur supernatan NF dalam baterai uji genotoksisitas standar, yang mencakup uji mutasi balik bakteri dan uji mikronukleus sel mamalia in vitro (Komite Ilmiah EFSA, 2011 ).

Dalam uji mutasi balik bakteri (Tidak dipublikasikan, 2023a ), kultur supernatan NF diuji dengan lima galur Salmonella typhimurium (TA1535, TA1537, TA98, TA100 dan TA102), dengan dan tanpa aktivasi metabolik. Untuk meningkatkan konsentrasi setiap komponen kultur supernatan, 500 μL digunakan per plat. Uji pertama dilakukan dengan mengikuti teknik penggabungan plat standar, dengan dan tanpa aktivasi metabolik. Dalam uji pertama ini, peningkatan signifikan dalam jumlah koloni dicatat pada semua galur yang diuji, dengan dan tanpa aktivasi metabolik. Untuk menyelidiki apakah peningkatan jumlah koloni yang diamati disebabkan oleh adanya asam amino dan/atau peptida dalam item uji (yaitu kultur supernatan), uji mutagenisitas kedua dilakukan dengan menggunakan metode treat & wash bersamaan dengan teknik penggabungan plat standar. Dalam pengujian kedua, peningkatan signifikan dalam jumlah koloni juga diamati dengan dan tanpa aktivasi metabolik ketika metode penggabungan pelat standar diterapkan. Namun, ketika menggunakan metode treat & wash, peningkatan signifikan secara statistik dan/atau biologis dalam jumlah koloni diamati pada semua galur kecuali TA100 dengan adanya aktivasi metabolik saja. Dengan tidak adanya aktivasi metabolik, tidak ada peningkatan signifikan secara biologis atau statistik dalam jumlah revertan yang dicatat dalam galur mana pun.

Supernatan kultur NF juga diuji dalam uji mikronukleus sel mamalia in vitro (Tidak dipublikasikan, 2023b ). Sel limfoblastoid TK6 manusia terpapar pada supernatan hingga konsentrasi 10%, yang dianggap oleh penulis studi sebagai konsentrasi tertinggi yang sesuai dengan sistem uji, dengan mempertimbangkan hasil uji sitotoksisitas pendahuluan dan osmolalitas. Konsentrasi aktual tertinggi yang diuji dalam uji utama untuk pengobatan jangka pendek (3 jam) dengan dan tanpa aktivasi metabolik masing-masing adalah 10% dan 7%. Dalam pengobatan jangka panjang (27 jam; tidak ada aktivasi metabolik), konsentrasi tertinggi yang diuji adalah 1,8%. Minimal 2000 sel mononukleus dianalisis per konsentrasi. Dalam pengobatan jangka pendek dengan dan tanpa aktivasi metabolik, tidak ada peningkatan yang signifikan secara statistik atau biologis dalam jumlah sel mikronukleus yang diamati. Sebaliknya, dalam perawatan jangka panjang (tanpa aktivasi metabolik), kultur supernatan menginduksi peningkatan yang signifikan secara statistik dan biologis dalam jumlah sel mikronukleus.

Karena hasil positif dari dua uji genotoksisitas in vitro untuk kultur supernatan NF, pemohon melanjutkan untuk menguji kultur supernatan lebih lanjut secara in vivo dengan melakukan uji mikronukleus eritrosit mamalia in vivo yang dilakukan dalam sumsum tulang tikus yang dikombinasikan dengan uji komet alkali mamalia in vivo di hati dan duodenum (Tidak diterbitkan, 2024c ).

Tikus Sprague–Dawley (jantan; 5/kelompok) diobati secara oral dengan kultur supernatan sekali sehari selama 3 hari berturut-turut, dengan jarak 24 jam, hingga volume dosis maksimum yang dapat diterima untuk item uji berair, yaitu 20 mL/kg bb per hari. Dua dosis yang lebih rendah sebesar 10 dan 5 mL/kg bb per hari juga diuji. Waktu pengambilan sampel untuk kontrol pembawa (air steril) dan tiga kelompok perlakuan adalah 2–6 jam setelah perlakuan ketiga. Kontrol positif untuk uji mikronukleus adalah siklofosfamid, dengan waktu pengambilan sampel 24 jam setelah satu perlakuan. Sebanyak 4000 eritrosit polikromatik per hewan dinilai untuk keberadaan mikronukleus. Tidak ada peningkatan yang signifikan secara statistik dalam jumlah mikronukleus yang dicatat pada setiap dosis kultur supernatan.

Kontrol positif untuk uji komet adalah metilmetana sulfonat dan waktu pengambilan sampel adalah 2–6 jam setelah perlakuan ketiga (sama seperti untuk pembawa dan tiga kelompok perlakuan). Sebanyak 150 sel dianalisis per hewan, yaitu 750 sel per dosis. Baik di hati maupun duodenum tidak ada peningkatan signifikan secara statistik dalam persentase DNA ekor (% intensitas ekor) pada tiga dosis yang diuji. Namun, di duodenum, intensitas DNA ekor secara signifikan lebih rendah di kelompok dosis tengah (10 mL/kg bb per hari) dibandingkan dengan semua kelompok lainnya (tidak ada hubungan dosis respons). Panel menganggap temuan ini tidak perlu dikhawatirkan dan mencatat bahwa, dalam penelitian ini, kultur supernatan tidak menyebabkan putusnya untai DNA dan/atau tempat yang labil terhadap alkali di hati atau duodenum.

Dengan mempertimbangkan hasil uji genotoksisitas yang diberikan, Panel menganggap tidak ada kekhawatiran mengenai genotoksisitas NF.

3.10.2 Toksisitas subakut
Pemohon memberikan studi toksisitas oral dosis berulang selama 28 hari dengan periode pemulihan selama 14 hari (Sakamaki et al., 1989 ). Tidak ada informasi yang diberikan tentang GLP atau pedoman apa pun (OECD atau lainnya) yang diikuti. Tikus Sprague Dawley (12 per jenis kelamin dan kelompok) yang menerima Clostridium butyricum TO-A, Streptococcus faecalis T-110, Bacillus mesentericus TO-A, BIO-THREE®-1 (‘untuk penggunaan klinis’) atau BIO-THREE®-2 (‘untuk penggunaan hewan’) dengan dosis 3000 mg/kg bb per hari. Jumlah bakteri untuk C. butyricum adalah ≥ 10 10 CFU/g (menghasilkan ≥ 3 × 10 10 CFU/kg bb per hari). Kelompok kontrol tambahan menerima air suling.

Setelah periode pemberian dosis selama 28 hari selesai, lima hewan (per jenis kelamin dan kelompok) menjalani otopsi dan dua hewan (per jenis kelamin dan kelompok) menjalani pengujian bakteriologis. Lima hewan lainnya (per jenis kelamin dan kelompok) menjalani otopsi setelah periode pemulihan selesai.

Tidak ada kematian hewan yang terjadi selama penelitian. Tidak ada efek yang terlihat terkait kondisi/penampilan umum hewan, perubahan berat badan, atau asupan air. Tidak ada perbedaan yang diamati dalam hematologi atau kimia klinis pada kelompok C. butyricum TO-A jika dibandingkan dengan kontrol. Dalam analisis berat organ, perbedaan yang signifikan secara statistik (dibandingkan dengan kontrol) terlihat pada betina dalam kelompok C. butyricum TO-A, yang menunjukkan rasio berat adrenal kanan bawah/berat badan setelah pengobatan selesai. Pada hewan-hewan ini, tidak ada temuan histopatologi yang diamati.

Sampel darah (yang diambil dari aorta abdominal) dari kelompok kontrol dan semua kelompok perlakuan diuji untuk mengetahui keberadaan bakteri. Tidak ada bakteri yang terdeteksi dalam pengujian ini, yang menunjukkan bahwa tidak mungkin bakteri yang diberikan dipindahkan dari sel epitel mukosa usus halus ke jaringan tubuh.

3.10.3 Toksisitas subkronis
Pemohon mengajukan studi toksisitas oral dosis berulang selama 90 hari (Tidak dipublikasikan, 2014 ). Menurut laporan studi lengkap, studi tersebut mengikuti Standar GLP untuk Studi Keamanan Non-Klinis pada Obat-obatan (Peraturan Kementerian Kesehatan dan Kesejahteraan No. 21, 26 Maret 1997, direvisi sebagian pada 13 Juni 2008, Peraturan No. 114, Jepang) dan Pedoman untuk Studi Toksisitas Dosis Berulang (Pemberitahuan No. 655, 5 April 1999, Kementerian Kesehatan dan Kesejahteraan, Jepang).

Penelitian ini terdiri dari satu kelompok kontrol dan lima kelompok perlakuan. Tikus Sprague Dawley (10 per jenis kelamin dan kelompok) yang menerima melalui gavage selama 13 minggu (i) pembawa (pati kentang (kontrol)), (ii) E. faecium 11 T-110 (pada 3000 mg/kg bb per hari), (iii) C. butyricum TO-A (yaitu NF) (pada 3000 mg/kg bb per hari; 3 × 10 8 CFU/g), (iv) B. subtilis 11 TO-A (pada 3000 mg/kg bb per hari) dan BIO-THREE® (v) pada 1500 mg/kg bb per hari dan (vi) pada 3000 mg/kg bb per hari. Jumlah bakteri C. butyricum TO-A dalam BIO-THREE® adalah 2 × 10 7 CFU/g. Jumlah B. subtilis TO-A dan E. faecium dalam BIO-THREE® masing-masing adalah 3 × 106 CFU /g dan 5 × 107 CFU /g.

Tidak ada kematian yang terjadi pada kelompok mana pun. Tidak ada tanda-tanda klinis yang disebabkan oleh pengobatan dengan bahan uji yang terlihat pada hewan apa pun dalam kelompok mana pun. Beberapa perbedaan yang signifikan secara statistik antara kelompok kontrol dan kelompok perlakuan terlihat pada beberapa titik selama penelitian mengenai berat badan dan konsumsi makanan, tetapi perbedaannya kecil dan tidak konsisten.

Mengenai parameter hematologi, konsentrasi hemoglobin korpuskular rata-rata lebih tinggi pada jantan yang diobati dengan C. butyricum TO-A dibandingkan dengan kontrol (33,3 ± 0,6 g/dL vs. 33,7 ± 0,3 g/dL (rata-rata ± SD)), yang dianggap insidental karena tidak ada perubahan berarti yang dicatat dalam parameter eritrosit lainnya. Dalam kimia klinis, konsentrasi kreatin kinase lebih rendah pada betina yang diobati dengan C. butyricum TO-A jika dibandingkan dengan kontrol (102 ± 9 U/L vs. 92 ± 5 U/L (rata-rata ± SD)); namun, ini tidak terkait dengan perubahan histopatologi. Tidak ada temuan dalam kelompok C. butyricum untuk oftalmologi, urinalisis, patologi kasar, histopatologi atau berat organ.

Panel menganggap bahwa C. butyricum TO-A yang diuji pada 3000 mg/kg bb per hari, yang setara dengan 9 × 108 CFU /kg bb per hari, tidak menimbulkan efek samping dalam penelitian ini. Dengan demikian, Panel menganggap tingkat dosis ini sebagai tingkat tanpa efek samping yang diamati (NOAEL) dalam penelitian ini.

3.10.4 Data manusia
Pemohon menyerahkan sembilan studi manusia (Chen et al., 2010 ; Dharani Sudha et al., 2017 ; Huang et al., 2014 ; Joh et al., 1993 ; Naranayappa, 2008 ; Rammohan et al., 2015 ; Sharma et al., 2008 ; Urao et al., 1999 ; Yoshimatsu et al., 2015 ) pada kelompok populasi yang sakit dengan BIO-THREE®, yang mencakup C. butyricum TO-A (yaitu NF) ditambah dua galur tambahan. Pemohon juga mengambil melalui pencarian literatur sejumlah studi manusia yang dilakukan dengan berbagai galur C. butyricum lainnya . Panel mencatat bahwa tidak ada studi manusia dengan NF saja yang disediakan dan menganggap bahwa tidak ada kesimpulan yang dapat ditarik dari studi manusia yang diserahkan untuk menetapkan keamanan NF.

3.11 Alergenisitas
Tidak ditemukan bukti reaksi alergi terhadap C. butyricum dalam penelusuran literatur yang dilakukan oleh pemohon. Selain itu, menurut pemohon, tidak ada laporan reaksi alergi terhadap NF di negara-negara tempat C. butyricum TO-A telah dikonsumsi (sebagai bagian dari BIO-THREE®) selama beberapa dekade.

Panel menganggap bahwa risiko reaksi alergi terhadap NF pada populasi umum tidak diketahui tetapi diperkirakan rendah.

4 DISKUSI
NF, yang menjadi subjek aplikasi, adalah C. butyricum TO-A.

Pemohon bermaksud memasarkan NF sebagai suplemen makanan. Target populasi yang diusulkan oleh pemohon adalah masyarakat umum, tidak termasuk bayi di bawah usia 3 bulan.

Panel menganggap bahwa NF telah terkarakterisasi secara memadai. Informasi yang diberikan mengenai proses produksi, komposisi, stabilitas, dan spesifikasi NF telah memadai dan tidak menimbulkan masalah keamanan.

Dengan mempertimbangkan hasil pengujian genotoksisitas yang diberikan, Panel berpendapat bahwa, secara keseluruhan, tidak ada kekhawatiran mengenai genotoksisitas NF.

Satu studi toksisitas oral selama 90 hari pada tikus Sprague–Dawley diajukan di mana C. butyricum TO-A diuji pada 9 × 108 CFU /kg bb per hari, yang diidentifikasi oleh Panel sebagai NOAEL dari studi ini. Dengan mempertimbangkan faktor ketidakpastian sebesar 200 untuk memperhitungkan variabilitas antar dan intraspesies (10 × 10) dan durasi studi (dari subkronis ke kronis; faktor 2), dosis aman yang dihasilkan pada manusia adalah 4,5 × 106 CFU /kg bb per hari.

Mengingat bahwa kolonisasi bakteri awal yang tepat pada saluran pencernaan pada manusia, khususnya selama 3 tahun pertama kehidupan, sangat memengaruhi kesehatan selama masa bayi dan kanak-kanak (Romano-Keeler & Sun, 2022 ; Taddei & Neu, 2023 ), bahwa sedikit yang diketahui tentang bagaimana mikrobiota ibu membentuk sistem imun ibu-janin selama kehamilan (Koren et al., 2024 ), bahwa gangguan pada mikrobiota di awal kehidupan dapat memiliki efek kesehatan yang bertahan lama hingga dewasa dan dengan mempertimbangkan bahwa studi toksisitas oral 90 hari dilakukan pada tikus dewasa, yang menghambat ekstrapolasi hasil ke tahap awal kehidupan pada manusia, Panel menganggap bahwa populasi target untuk NF harus dibatasi pada anak-anak di atas 3 tahun, remaja dan dewasa, tidak termasuk wanita hamil dan menyusui. Dosis aman yang sesuai pada masing-masing kelompok populasi ditunjukkan dalam Tabel 5 .

TABEL 5. Dosis aman NF dengan mempertimbangkan berat badan default dan dosis aman (berdasarkan berat badan) 4,5 × 106 ^CFU /kg bb per hari.

Singkatan: CFU, unit pembentuk koloni.
Berat badan default untuk setiap kelompok populasi tersedia di Komite Ilmiah EFSA ( 2012 ).

5 KESIMPULAN
Panel menyimpulkan bahwa NF, C. butyricum TO-A, aman pada 1,0 × 108 CFU /hari untuk anak-anak lain (3 hingga < 10 tahun), 2,0 × 108 CFU /hari untuk remaja berusia 10 hingga < 14 tahun, 2,8 × 108 CFU /hari untuk remaja berusia 14 hingga < 18 tahun, dan 3,2 × 108 CFU /hari untuk orang dewasa, tidak termasuk wanita hamil dan menyusui.

5.1 Perlindungan data kepemilikan sesuai dengan Pasal 26 Peraturan (UE) 2015/2283
Panel tidak dapat mencapai kesimpulan tentang keamanan NF berdasarkan kondisi penggunaan yang diusulkan tanpa data yang diklaim sebagai hak milik oleh pemohon (Bagian 2.1 ).

SINGKATAN
ADI
Asupan Harian yang Dapat Diterima
ADME
penyerapan, distribusi, metabolisme dan ekskresi
ANI
identitas nukleotida rata-rata
Bahasa Indonesia: AOAC
Asosiasi Kolaborasi Analisis Resmi
APC
hitungan lempeng mesofilik aerobik
Bio-kimia
Panel tentang Bahaya Biologis
badan basah
berat badan
C .
Bakteri Klostridium
CFU
unit pembentuk koloni
DMSO
Dimetil sulfoksida
DNA
asam deoksiribonukleat
ID
Standar Eropa
Bahasa Inggris: FAF
Panel tentang Bahan Tambahan Pangan dan Perasa
UMPAN BALIK
Panel tentang Bahan Tambahan dan Produk atau Zat yang Digunakan dalam Pakan Ternak
GLP
Praktik Laboratorium yang Baik
GMP
Praktik Manufaktur yang Baik
Sistem Informasi Keselamatan dan Kesehatan Kerja (HACCP)
Analisis Bahaya Titik Kendali Kritis
HPLC
kromatografi cair kinerja tinggi
ICP-OES
Spektroskopi emisi optik plasma yang digabungkan secara induktif
Bahasa Indonesia
Organisasi Internasional untuk Standardisasi
jumlah
batas kuantifikasi
dan
tidak terdeteksi
Bahasa Indonesia: NCBI
Pusat Informasi Bioteknologi Nasional
Tidak ada jaminan
Panel tentang Nutrisi, Makanan Baru dan Alergen Makanan
Tidak ada
makanan baru
NOAEL
tidak ada tingkat efek samping yang diamati
Organisasi untuk Kerjasama Ekonomi dan Pembangunan (OECD)
Organisasi untuk Kerjasama Ekonomi dan Pembangunan
PCB (papan sirkuit terpadu)
Poliklorinasi bifenil
QPS
praduga keselamatan yang memenuhi syarat
RH
kelembaban relatif
RNA-nya
asam ribonukleat ribosomal
S
Satuan Svedberg
SD
simpangan baku
SEJARAH
Mikroskop Elektron Pemindaian
Ya
silikon
TAM
jumlah total mikroba aerobik
Tg
Pedoman Tes
TYMC
jumlah total ragi dan jamur
Satu
Badan standardisasi Spanyol
PKS
Basis Data Faktor Virulensi
WGS
urutan genom utuh
PEMINTA
Komisi Eropa

PERTANYAAN NOMOR
EFSA-Q-2022-00010

HAK CIPTA UNTUK KONTEN NON-EFSA
EFSA dapat menyertakan gambar atau konten lain yang tidak memiliki hak cipta. Dalam kasus tersebut, EFSA menunjukkan pemegang hak cipta dan pengguna harus meminta izin untuk mereproduksi konten dari sumber aslinya.

ANGGOTA PANEL
Dominique Turck, Torsten Bohn, Montaña Cámara, Jacqueline Castenmiller, Stefaan De Henauw, Karen Ildico Hirsch-Ernst, Ángeles Jos, Alexandre Maciuk, Inge Mangelsdorf, Breige McNulty, Androniki Naska, Kristina Pentieva, Alfonso Siani dan Frank Thies.

Catatan
1 Peraturan Pelaksanaan Komisi (UE) 2024/2185 tanggal 3 September 2024 tentang otorisasi sediaan Bacillus subtilis FERM BP-07462, Enterococcus lactis FERM BP-10867, dan Clostridium butyricum FERM BP-10866 sebagai aditif pakan untuk semua spesies unggas untuk penggemukan, semua spesies unggas yang dipelihara untuk bertelur atau berkembang biak, dan unggas hias (pemegang otorisasi: Toa Biopharma Co., Ltd.). C/2024/5963. OJ L, 2024/2185.
2 Keputusan Pelaksanaan Komisi tertanggal 11 Desember 2014 yang mengesahkan penempatan Clostridium butyricum (CBM 588) di pasarsebagai bahan makanan baru berdasarkan Peraturan (EC) No 258/97 Parlemen Eropa dan Dewan (diberitahukan berdasarkan dokumen C(2014) 9345). OJ L 359, 16.12.2014, hlm. 153–154.
3 Peraturan Pelaksanaan Komisi (UE) 2017/2470 tanggal 20 Desember 2017 yang menetapkan daftar Uni tentang makanan baru sesuai dengan Peraturan (UE) 2015/2283 Parlemen Eropa dan Dewan tentang makanan baru. OJ L 351, 30.12.2017, hlm. 72–201.
4 https://open.efsa.europa.eu/questions/EFSA-Q-2022-00010 .
5 Peraturan Pelaksanaan Komisi (UE) 2017/2469 tanggal 20 Desember 2017 yang menetapkan persyaratan administratif dan ilmiah untuk aplikasi yang disebutkan dalam Pasal 10 Peraturan (UE) 2015/2283 Parlemen Eropa dan Dewan tentang makanan baru. OJ L 351, 30.12.2017, hlm. 64–71.
6 Peraturan (EC) No 178/2002 Parlemen Eropa dan Dewan tanggal 28 Januari 2002 yang menetapkan prinsip-prinsip umum dan persyaratan hukum pangan, membentuk Otoritas Keamanan Pangan Eropa, dan menetapkan prosedur dalam hal keamanan pangan. OJ L 31, 1.2.2002, hlm. 1–48.
7 Keputusan tersedia di:https://www.efsa.europa.eu/en/corporate-pubs/transparency-regulation-practical-arrangements.
8 Versi non-rahasia dari berkas tersebut telah diterbitkan di Open.EFSA dan tersedia di tautan berikut: https://open.efsa.europa.eu/dossier/NF-2021-1068 .
9 https://connect.efsa.europa.eu/RM/s/consultations/publicconsultation2/a0l09000006r2l7/pc0430 .
10 Peraturan Pelaksanaan Komisi (UE) 2024/2185 tanggal 3 September 2024 tentang otorisasi sediaan Bacillus subtilis FERM BP-07462, Enterococcus lactis FERM BP-10867, dan Clostridium butyricum FERM BP-10866 sebagai aditif pakan untuk semua spesies unggas untuk penggemukan, semua spesies unggas yang dipelihara untuk bertelur atau berkembang biak, dan unggas hias (pemegang otorisasi: Toa Biopharma Co., Ltd.). C/2024/5963. OJ L, 2024/2185.
11 Untuk nama-nama terbaru yang diterima, silakan lihat: https://the-icsp.org/code-of-nomenclatur .