ABSTRAK
Gangguan tidur merupakan masalah kesehatan umum yang memengaruhi sebagian besar populasi orang dewasa. Bukti yang muncul menunjukkan bahwa faktor makanan, khususnya asupan asam lemak tak jenuh ganda (PUFA), dapat berperan dalam memodulasi kualitas tidur. Studi ini bertujuan untuk menyelidiki hubungan antara asam lemak tak jenuh ganda omega-3 (ω-3) dan asam lemak tak jenuh ganda omega-6 (ω-6) dengan gangguan tidur menggunakan data survei lintas bagian dan data dari studi asosiasi genomik (GWAS). Menggunakan data dari Survei Pemeriksaan Kesehatan dan Gizi Nasional (NHANES, 2005–2018), kami menganalisis kohort yang terdiri dari 31.920 peserta, dengan variabel independen utama adalah asupan asam lemak tak jenuh ganda ω-3 dan ω-6. Regresi multivariat digunakan untuk menilai hubungan, dan analisis spline kubik terbatas digunakan untuk mengeksplorasi potensi hubungan dosis-respons non-linier. Analisis randomisasi Mendel (MR) dua sampel dilakukan untuk mengevaluasi efek kausal kadar beberapa asam lemak terhadap risiko gangguan tidur. Untuk analisis pada data NHANES, partisipan dengan gangguan tidur memiliki asupan ω-3 PUFA yang secara signifikan lebih rendah (1,71 ± 1,11 g) dibandingkan dengan mereka yang tidak mengalami gangguan tidur (1,78 ± 1,14 g, p  < 0,001). Analisis regresi mengungkapkan bahwa asupan ω-3 PUFA yang lebih tinggi dikaitkan dengan risiko gangguan tidur yang lebih rendah, sedangkan analisis MR menunjukkan bahwa rasio ω-6 yang lebih tinggi terhadap kadar asam lemak total secara kausal dikaitkan dengan risiko gangguan tidur yang lebih rendah (IVW OR = 0,930, 95% CI: 0,880–0,983, p  = 0,011). Temuan kami menunjukkan bahwa peningkatan asupan ω-3 FA dan peningkatan rasio ω-6 terhadap kadar asam lemak total dapat dikaitkan dengan risiko gangguan tidur yang lebih rendah, yang menyoroti potensi manfaat modifikasi pola makan untuk kesehatan tidur. Penelitian di masa mendatang harus lebih jauh mengeksplorasi hubungan ini dan mempertimbangkan studi intervensi untuk menetapkan kausalitas dan rekomendasi pola makan yang optimal untuk mencegah gangguan tidur.

1 Pendahuluan
Gangguan tidur semakin diakui sebagai masalah kesehatan masyarakat yang signifikan, yang memengaruhi jutaan orang di seluruh dunia. Di Amerika Serikat saja, diperkirakan sekitar 50–70 juta orang dewasa mengalami beberapa bentuk gangguan tidur (Shokoueinejad et al. 2017 ). Gangguan ini dikaitkan dengan berbagai hasil kesehatan yang merugikan, termasuk penyakit kardiovaskular, diabetes, dan gangguan fungsi kognitif (Miller dan Howarth 2023 ; Reutrakul dan Van Cauter 2018 ; Yaffe et al. 2014 ). Meskipun tersedia alat diagnostik dan perawatan seperti perawatan farmakologis dan intervensi perilaku, banyak gangguan tidur masih kurang terdiagnosis dan kurang diobati (Xu et al. 2022 ; Jaqua et al. 2023 ). Hal ini menyoroti perlunya penelitian lebih lanjut tentang faktor-faktor yang memengaruhi kesehatan tidur dan pengembangan strategi intervensi yang lebih efektif.

Asam lemak tak jenuh ganda (PUFA), khususnya asam lemak omega-3 (ω-3) dan omega-6 (ω-6), telah menjadi subjek minat yang cukup besar sehubungan dengan peran potensial mereka dalam modulasi kesehatan tidur. ω-3 PUFA, yang umumnya ditemukan dalam minyak ikan, memiliki sifat anti-inflamasi dan penting untuk kesehatan otak (Laye et al. 2018 ). Di sisi lain, ω-6 PUFA, yang ditemukan dalam minyak sayur, telah diidentifikasi sebagai prekursor molekul pro-inflamasi (Yan et al. 2023 ). Diperkirakan bahwa keseimbangan antara asam lemak ini memberikan pengaruh pada sejumlah proses fisiologis, termasuk tidur. Namun, hubungan antara ω-3 dan ω-6 dan gangguan tidur masih kontroversial. Serangkaian studi menunjukkan bahwa kadar ω-3 FA berhubungan positif dengan kualitas tidur (Montgomery et al. 2014 ; Del Brutto et al. 2016 ; Irmisch et al. 2007 ; Scorza et al. 2013 ; Tang et al. 2018 ). Ada beberapa bukti bahwa ω-6 FA memiliki peran yang berbeda daripada ω-3 FA dalam tidur. Misalnya, studi cross-sectional menggunakan data NHANES 2007–2016 menunjukkan bahwa konsumsi ω-6 dan rasio ω-6 terhadap ω-3 berhubungan positif dengan risiko gangguan tidur (Luo et al. 2021 ). Uji klinis menunjukkan bahwa kualitas tidur pada penderita migrain dapat ditingkatkan secara signifikan dengan meningkatkan ω-3 FA dalam makanan, dengan atau tanpa mengurangi ω-6 FA (Faurot et al. 2023 ). Akan tetapi, banyak laporan yang gagal menemukan hubungan positif antara ω-3 FA dan kualitas tidur (Hysing et al. 2018 ; Cornu et al. 2010 ; Cohen et al. 2014 ; Hansen et al. 2014 ). Beberapa penelitian bahkan mencapai kesimpulan yang berlawanan: misalnya, meta-analisis oleh Rachel A. Murphy et al. menemukan bahwa konsentrasi ω-3 FA rantai panjang berhubungan negatif dengan durasi tidur (Murphy et al. 2022 ). Selain itu, hubungan antara ω-6 FA dan tidur masih belum pasti. Dalam sebuah studi cross-sectional terhadap anak-anak dan remaja Tiongkok, tidak ditemukan hubungan signifikan antara kadar ω-6 FA membran eritrosit dan gangguan tidur (Tang et al. 2018 ). Meskipun demikian, saat ini belum ada bukti konklusif untuk hubungan ini, dan penelitian lebih lanjut diperlukan untuk mengklarifikasinya.

Survei Pemeriksaan Kesehatan dan Gizi Nasional (NHANES) menyediakan kumpulan data yang berharga untuk menyelidiki hubungan antara asupan makanan dan hasil kesehatan dalam sampel representatif populasi AS. Namun, studi yang didasarkan pada data NHANES bersifat cross-sectional dan memiliki keterbatasan berikut: Pertama, tidak mungkin untuk menentukan hubungan kausal antara paparan dan penyakit. Oleh karena itu, NHANES hanya dapat menunjukkan hubungan dan tidak menetapkan hubungan kausal. Kedua, NHANES hanya dapat mencerminkan prevalensi penyakit pada titik waktu tertentu dan tidak dapat memberikan informasi tentang morbiditas. Terakhir, keakuratan data dipengaruhi oleh bias ingatan. Analisis randomisasi Mendelian (MR) dapat mengatasi beberapa keterbatasan studi cross-sectional. Pertama, karena variasi genetik tidak bergantung pada faktor lingkungan dan gaya hidup, NHANES dapat secara efektif mengendalikan variabel pengganggu yang dapat memengaruhi hasil kesehatan, sehingga meningkatkan objektivitas temuan penelitian. Kedua, dengan menggunakan variasi genetik sebagai variabel alat, adalah mungkin untuk mengidentifikasi hubungan kausal yang sebenarnya dengan lebih akurat, daripada sekadar hubungan korelasional. Lebih jauh lagi, variasi genetik ditetapkan pada saat pembuahan, sehingga menghilangkan masalah kausalitas terbalik.

Dalam studi ini, kami menggunakan data dari basis data NHANES, dengan fokus pada 31.920 peserta berusia 20 tahun ke atas. Gangguan tidur dinilai melalui kuesioner yang dilaporkan sendiri, mengkategorikan peserta ke dalam kelompok dengan dan tanpa gangguan tidur. Asupan makanan ω-3 dan ω-6 PUFA dihitung berdasarkan rata-rata dua ingatan makanan 24 jam. Model regresi logistik multivariabel yang disesuaikan digunakan untuk mengevaluasi hubungan, dengan mengendalikan faktor pengganggu potensial seperti usia, jenis kelamin, ras, tingkat pendidikan, status perkawinan, pendapatan keluarga, indeks massa tubuh (IMT), aktivitas fisik, status merokok, dan penyakit penyerta seperti diabetes dan hipertensi. Selain itu, analisis spline kubik terbatas dilakukan untuk mengeksplorasi potensi hubungan dosis-respons. Kemudian analisis MR dua sampel diterapkan untuk mengevaluasi apakah ada efek kausal dari beberapa asam lemak yang beredar (asam lemak omega-3, asam lemak omega-6, asam lemak omega-6/omega-3, asam lemak omega-3/total, asam lemak omega-6/total, asam dokosaheksaenoat, asam dokosaheksaenoat/total asam lemak, asam linoleat, asam linoleat/total asam lemak, asam lemak tak jenuh tunggal, asam lemak tak jenuh ganda, asam lemak jenuh, dan asam lemak total) pada risiko gangguan tidur.

Penelitian ini bertujuan untuk mengisi kesenjangan ini dengan meneliti hubungan antara asam lemak ω-3 dan ω-6 dengan gangguan tidur menggunakan data NHANES (2005–2018) dan analisis MR. Dengan mengidentifikasi faktor-faktor makanan yang memengaruhi kesehatan tidur, penelitian ini dapat memberikan informasi mengenai pedoman kesehatan masyarakat dan berkontribusi pada pengembangan intervensi gizi yang ditargetkan untuk meningkatkan kualitas tidur dan kesehatan secara keseluruhan.

2 Metode
2.1 Desain Studi dan Ketersediaan Data
Dalam penelitian ini, data dari NHANSE (2005–2018) digunakan untuk memperoleh 70.190 partisipan. Pertama, 30.441 partisipan berusia di bawah 20 tahun dikecualikan. Kedua, 28 partisipan tanpa gangguan tidur dikecualikan. Kemudian, 4423 partisipan tanpa data PUFA dikecualikan. Terakhir, 3378 partisipan dengan kovariat yang tidak lengkap dihilangkan, sehingga tersisa 31.920 partisipan yang disertakan dalam penelitian. Proses pemilihan sampel diilustrasikan dalam Gambar 1A .

Kemudian analisis MR dua sampel dilakukan untuk menentukan dampak kausal dari beberapa asam lemak yang bersirkulasi pada risiko gangguan tidur Gambar 1B . Pemilihan variabel instrumental (IV) dipandu oleh tiga asumsi dasar berikut: (1) IV yang dipilih harus terkait secara signifikan dengan paparan ( p  < 5E-06); (2) IV independen dari faktor pengganggu yang dapat memengaruhi paparan dan hasil; (3) IV hanya dapat memengaruhi hasil melalui efeknya pada paparan dan tidak dapat memengaruhi hasil dengan cara lain (LD: r 2  < 0,001 dalam 10.000 kb). Analisis MR dalam penelitian ini mematuhi pedoman STROBE-MR (Skrivankova et al. 2021 ). Daftar periksa STROBE-MR ditunjukkan pada Tabel S1 .

Data GWAS yang digunakan untuk analisis MR diperoleh dari basis data GWAS yang tersedia untuk umum, dan informasi terperinci disediakan dalam Tabel 1. Kumpulan data untuk sifat-sifat yang terkait dengan asam lemak, termasuk asam lemak omega-3, asam lemak omega-6, asam lemak omega-6/omega-3, asam lemak omega-3/total, asam lemak omega-6/total, asam dokosaheksaenoat, asam dokosaheksaenoat/total, asam linoleat, asam linoleat/total, asam lemak tak jenuh tunggal, asam lemak tak jenuh ganda, asam lemak jenuh, dan asam lemak total, diperoleh dari GWAS MRCIEU ( https://gwas.mrcieu.ac.uk/ ) (Richardson et al. 2022 ). Kumpulan data hasil gangguan tidur diperoleh dari FinnGenR10 dengan 49.880 kasus dan 358.194 kontrol ( https://storage.googleapis.com/finngen-public-data-r10/summary_stats/finngen_R10_SLEEP.gz ) (Kurki et al. 2023 ). Data yang hilang telah dihapus. Data paparan dan hasil di atas berasal dari populasi Eropa. Protokol dan rincian studi GWAS yang termasuk dalam studi ini telah didaftarkan sebelumnya (ID akses GCST90092816, GCST90092817, GCST90092880, GCST90092881, GCST90092928, GCST90092931-GCST90092935, GCST90092939, GCST90092980, GCST90092987, https://www.ebi.ac.uk/gwas/ ).

TABEL 1. Data GWAS yang digunakan dalam penelitian ini.

 

Hasil	ID GWAS	nKasus	nKontrol	Populasi	Konsorsium
Gangguan tidur	finngen_R10_TIDUR	49.880	3.58.194 orang	Eropa	Bahasa Inggris FinnGen

2.2 Variabel
Untuk analisis data NHANSE, variabel hasil yang disertakan adalah data yang dilaporkan sendiri oleh pasien mengenai gangguan tidur dan dalam data kuesioner, peserta ditanyai “Apakah Anda pernah memberi tahu dokter atau tenaga kesehatan lain bahwa Anda mengalami kesulitan tidur? Peserta dimasukkan ke dalam kelompok gangguan tidur jika mereka menjawab ‘ya’ dan ke dalam kelompok tidak mengalami gangguan tidur jika mereka menjawab ‘tidak’” (Zhong et al. 2024 ).

Variabel independen yang dimasukkan adalah asupan ω-3 dan ω-6 FA. ω-3 FA termasuk asam α-linoleat (ALA, 18:3), asam docosapentaenoic (DPA, 22:5), asam docosahexaenoic (DHA, 22:6), asam eicosapentaenoic (EPA, 20:5) dan asam stearidonic (SDA, 18:4). ω-6 FA termasuk asam eicosatetraenoic (AA, 20:4) dan asam linoleat (LA, 18:2) (Li et al. 2024 ). Selain itu, jumlah asupan ω-3 FA dan asupan ω-6 FA serta rasio asupan ω-3 FA terhadap asupan ω-6 FA juga dimasukkan dalam penelitian ini. Data asupan FA diperoleh dari rata-rata dua ingatan makanan 24 jam dari pangkalan data NHANES, dengan ingatan makanan 24 jam pertama dilakukan di Pusat Pemeriksaan Bergerak (MEC) dan ingatan makanan 24 jam kedua dilakukan melalui wawancara telepon.

Kovariat meliputi: usia, jenis kelamin, ras, tingkat pendidikan (Edu), pernikahan, PIR, BMI, status aktivitas fisik (Activity), merokok, dan penyakit penyerta (diabetes dan hipertensi). Pengelompokan usia: ≤ 60 tahun, > 60 tahun; pengelompokan ras: kulit putih non-Hispanik, kulit hitam non-Hispanik, Meksiko Amerika, atau ras lain; pengelompokan merokok: tidak pernah (<100 batang rokok seumur hidup), mantan perokok (>100 batang rokok seumur hidup tetapi bukan perokok saat ini), atau saat ini; pengelompokan aktivitas: ya (aktivitas sedang atau berat), tidak (tidak ada aktivitas sedang atau berat).

2.3 Uji Heterogenitas dan Pleiotropi
Statistik Q Cochran digunakan untuk uji heterogenitas, dan nilai Q yang lebih besar dari 0,05 dianggap tidak heterogen. Metode intersep MR-Egger dilakukan untuk uji pleiotropi horizontal, dan sampel dengan p  < 0,05 dikeluarkan dari analisis selanjutnya. Selain itu, efek penghilangan setiap SNP pada SNP yang tersisa dinilai menggunakan metode leave-one-out.

2.4 Analisis Statistik
Model regresi logistik multivariat digunakan untuk menilai hubungan antara asupan asam lemak omega-3 dan omega-6 dengan gangguan tidur berdasarkan rasio peluang (OR) dan interval kepercayaan 95% (IK 95%). Model 1 disesuaikan untuk tidak ada; model 2 disesuaikan untuk usia, jenis kelamin, ras, Pendidikan, pernikahan, PIR, dan BIM; model 3 disesuaikan untuk usia, jenis kelamin, ras, Pendidikan, pernikahan, PIR, BIM, aktivitas, merokok, diabetes, dan hipertensi. Plot spline kubik terbatas (RCS) digunakan untuk menganalisis kemungkinan hubungan dosis-respons non-linier antara asupan asam lemak ω-3 dan ω-6 dengan gangguan tidur. Selain itu, analisis subkelompok dilakukan untuk menguji stabilitas hubungan antara asupan asam lemak ω-3 dan ω-6 dengan gangguan tidur. Semua hasil IVW dikoreksi dengan beberapa pengujian menggunakan metode FDR.

Analisis statistik dilakukan menggunakan perangkat lunak R (versi 4.3.3), dan p  < 0,05 dianggap signifikan secara statistik. Paket R “MRPRESSO” (Verbanck et al. 2018 ), “TwoSampleMR” (Rasooly dan Patel 2019 ), dan “MendelianRandomization” (Yavorska dan Burgess 2017 ) digunakan untuk analisis MR. Variabel kontinu dinyatakan sebagai mean ± simpangan baku, dan ANOVA satu arah digunakan untuk perbandingan antar kelompok. Data untuk variabel kategorikal dinyatakan sebagai jumlah kasus (%) dan perbandingan antar kelompok dilakukan menggunakan uji chi-square.

3 Hasil
3.1 Analisis Karakteristik
Dari 31.920 orang yang disertakan dalam penelitian ini, 8.225 (26%) berada dalam kelompok gangguan tidur dan 23.695 (74%) berada dalam kelompok tidak mengalami gangguan tidur. Karakteristik dasar semua partisipan yang disertakan dalam penelitian ini ditunjukkan dalam Tabel 2. Rata-rata ± varians asupan ω-3 FA di antara semua partisipan yang disertakan dalam penelitian ini adalah 1,76 ± 1,13, dengan 1,71 ± 1,11 pada kelompok gangguan tidur dan 1,78 ± 1,14 pada kelompok tidak mengalami gangguan tidur. Asupan ω-6 FA memiliki rata-rata ± varians 15,78 ± 9,26, dengan 15,89 ± 9,28 pada kelompok gangguan tidur dan 15,48 ± 9,18 pada kelompok tidak mengalami gangguan tidur. Rata-rata ± varians jumlah asupan ω-3 FA dan asupan ω-6 FA sebesar 17,55 ± 10,19, yang mana 17,19 ± 10,10 pada kelompok gangguan tidur dan 17,67 ± 10,10 pada kelompok tidak gangguan tidur sebesar 17,67 ± 10,22.

TABEL 2. Karakteristik dasar peserta yang diikutsertakan.

Catatan: ω-3: Total asupan asam lemak omega-3; ω-6: Total asupan asam lemak omega-6; (ω-3) + (ω-6): jumlah asupan asam lemak omega-3 dan asupan asam lemak omega-6; (ω-3)/(ω-6): rasio asupan asam lemak omega-3 terhadap asupan asam lemak omega-6.
Singkatan: BMI, indeks massa tubuh; PIR, rasio pendapatan keluarga terhadap kemiskinan.

Asupan asam lemak ω-3, asam lemak ω-6, dan jumlah asam lemak ω-3 dan asam lemak ω-6 secara signifikan lebih rendah pada kelompok gangguan tidur dibandingkan pada kelompok tanpa gangguan tidur ( p  < 0,001). Namun, rasio asupan asam lemak ω-3 terhadap asupan asam lemak ω-6 memiliki nilai p sebesar 0,04 jika membandingkan kelompok gangguan tidur dengan kelompok tanpa gangguan tidur, yang mendekati nilai kritis.

Peserta dalam kelompok gangguan tidur lebih mungkin berjenis kelamin perempuan, berusia ≤ 60 tahun, berkulit putih, berpendidikan perguruan tinggi, belum menikah, memiliki PIR lebih rendah, BMI lebih tinggi, aktivitas sedang atau berat, tidak pernah merokok, dan tidak menderita diabetes.

Peserta dikelompokkan ke dalam tertil berdasarkan tingkat asupan ω-3 FA: T1 (ω-3 ≤ 1,17 g), T2 (1,17 g < ω-3 ≤ 1,95 g), dan T3 (ω-3 > 1,95 g). Secara khusus, data asupan ω-3 FA diurutkan dalam urutan menaik, dengan persentil ke-33 dan ke-66 berfungsi sebagai ambang batas demarkasi untuk kategorisasi. Karakteristik dasar variabel antara kelompok ditunjukkan pada Tabel 3. Dengan menggunakan metodologi yang identik, peserta dikelompokkan ke dalam tertil berdasarkan asupan ω-6 FA: T1 (ω-6 ≤ 10,86 g), T2 (10,86 g < ω-6 ≤ 11,75 g), dan T3 (ω-6 > 11,72 g). Karakteristik dasar variabel antar kelompok ditunjukkan pada Tabel 4 .

TABEL 3. Karakteristik dasar berdasarkan kategori asupan asam lemak omega (ω-3).

Singkatan: BMI, indeks massa tubuh; PIR, rasio pendapatan keluarga terhadap kemiskinan.

TABEL 4. Karakteristik dasar menurut kategori asupan asam lemak omega-6 (ω-6).

Singkatan: BMI, indeks massa tubuh; PIR, rasio pendapatan keluarga terhadap kemiskinan.

Peserta dengan asupan ω-3 FA dan asupan ω-6 FA yang lebih tinggi dalam populasi yang disertakan dalam penelitian ini cenderung memiliki karakteristik berikut: laki-laki, usia ≤ 60 tahun, berkulit putih, berpendidikan perguruan tinggi atau lebih tinggi, menikah, nilai PIR yang lebih tinggi, aktivitas sedang atau berat, tidak pernah merokok, dan tidak menderita diabetes. Selain itu, proporsi peserta dengan gangguan tidur secara signifikan lebih rendah pada kelompok T2 dan T3 dibandingkan pada kelompok T1 untuk asupan ω-3 FA dan asupan ω-6 FA ( p  < 0,001).

3.2 Analisis Hubungan Dosis-Respon
Analisis hubungan dosis-respons dilakukan menggunakan spline kubik terbatas, dan hasilnya ditunjukkan dalam Gambar 2. Asupan ω-3 FA, asupan ω-6 FA, jumlah asupan ω-3 FA, dan asupan ω-6 FA berhubungan dengan gangguan tidur dalam bentuk U dengan karakteristik nonlinier signifikan (Pnonlinier < 0,05); sedangkan hubungan antara rasio asupan ω-3 FA terhadap asupan ω-6 FA dan gangguan tidur berbentuk L (Pnonlinier = 0,181).

3.3 Analisis Regresi Logistik
Tiga model analisis regresi logistik dikembangkan secara terpisah untuk menilai empat variabel asupan asam lemak ω-3, asupan asam lemak ω-6, jumlah asupan asam lemak ω-3 dan ω-6, rasio asupan asam lemak ω-3 terhadap ω-6, dan gangguan tidur. Hasilnya ditunjukkan pada Tabel 5 .

TABEL 5. Analisis regresi Cox multivariat asupan FA dan gangguan tidur.

Catatan: Model 1 disesuaikan untuk tidak ada; Model 2 disesuaikan untuk Usia, Jenis Kelamin, Ras, Pendidikan, Pernikahan, PIR, BIM; Model 3 disesuaikan untuk Usia, Jenis Kelamin, Ras, Pendidikan, Pernikahan, PIR, BIM, Aktivitas, Merokok, Diabetes; Hipertensi.
Singkatan: CI, interval kepercayaan; HR, rasio bahaya.

Pada model 1 yang tidak disesuaikan, ketiga variabel asupan asam lemak ω-3, asupan asam lemak ω-6, dan jumlah asupan asam lemak ω-3 dan ω-6 secara signifikan berhubungan dengan gangguan tidur ( p  < 0,001, p untuk tren < 0,001), sedangkan rasio asupan asam lemak ω-3 terhadap ω-6 tidak berhubungan secara serupa dengan gangguan tidur ( p  = 0,057, p untuk tren = 0,046).

Dalam model 3, hanya asupan ω-3 FA yang dikaitkan secara signifikan dengan gangguan tidur ( p  = 0,005, p untuk tren = 0,026). Dengan menggunakan kelompok T1 (ω-3 ≤ 1,17 g) sebagai referensi, OR (95% CI) untuk kelompok T2 (1,17 g < ω-3 ≤ 1,95 g) adalah 0,91 (0,85–0,96), yang menunjukkan bahwa peserta dalam kelompok T2 memiliki risiko 9% lebih rendah untuk mengalami gangguan tidur dibandingkan dengan kelompok T1. OR (95% CI) untuk kelompok T3 (ω-3 > 1,95 g) adalah 0,93 (0,87–0,99), yang menunjukkan bahwa peserta dalam kelompok T3 memiliki risiko 7% lebih rendah untuk menderita gangguan tidur dibandingkan dengan kelompok T1. Namun, hubungan antara asupan ω-6 FA, jumlah asupan ω-3 dan ω-6 FA, dan rasio asupan ω-3 terhadap ω-6 FA dengan gangguan tidur tidaklah signifikan ( p  > 0,05, p untuk tren > 0,05).

Selain itu, hasil perhitungan model 2 pada dasarnya konsisten dengan hasil perhitungan model 3.

3.4 Analisis Subkelompok
Analisis subkelompok digunakan untuk menilai apakah hubungan antara asupan ω-3 FA dan gangguan tidur berbeda antara subkelompok. Kriteria stratifikasi subkelompok digunakan untuk jenis kelamin (laki-laki atau perempuan), ras (kulit putih non-Hispanik atau lainnya), pendidikan (kurang dari perguruan tinggi atau lebih tinggi), dan pernikahan (menikah atau lainnya). Hasil analisis subkelompok ditunjukkan pada Gambar 3. Hubungan antara asupan ω-3 FA dan gangguan tidur tidak signifikan pada subkelompok laki-laki ( p  > 0,05), sementara itu signifikan pada semua subkelompok lainnya ( p  < 0,05), dan hasil analisis pada dasarnya sama, menunjukkan stabilitas yang baik.

3.5 Estimasi Acak Mendelian (MR)
Hubungan kausal antara 13 sifat yang berhubungan dengan asam lemak dan risiko gangguan tidur dianalisis menggunakan lima metode MR termasuk IVW, MR Egger, simple mode, weighted median, dan weighted mode. Nilai P dari hasil ini ditunjukkan pada Gambar 4A . Berdasarkan hasil IVW, di antara 13 sifat yang berhubungan dengan asam lemak, omega-6/total FA ditemukan berhubungan secara kausal dengan risiko gangguan tidur (IVW OR = 0,930, 95% CI: 0,880–0,983, p  = 0,011; Gambar 4B ). Hasil median tertimbang dan modus tertimbang juga mendukung hubungan kausal ini (median tertimbang OR = 0,898, 95% CI: 0,838–0,963, p  = 0,003; modus tertimbang OR = 0,928, 95% CI: 0,866–0,993, p  = 0,034; Gambar 4B ). Hasilnya selanjutnya ditampilkan dalam diagram sebar pada Gambar 4C . Lima garis berwarna berbeda mewakili lima metode analisis MR, dengan kemiringan setiap garis menunjukkan arah hubungan kausal (Gambar 4C ). Menurut nilai OR dan hasil diagram sebar, omega-6/FA total merupakan faktor protektif untuk gangguan tidur. Diagram corong menunjukkan bahwa distribusi titik sebar secara umum simetris, yang menunjukkan tidak ada bias signifikan dalam hasil penelitian (Gambar 4D ).

3.6 Analisis Sensitivitas
Analisis sensitivitas, termasuk uji heterogenitas Cochran’s Q menggunakan metode MR-Egger dan IVW, dan uji pleiotropi menggunakan metode Egger_intercept, dilakukan dan hasilnya ditunjukkan pada Tabel 6. Untuk paparan omega-6/total FA, nilai p dari uji Cochran’s Q MR-Egger dan IVW lebih besar dari 0,05 (MR-Egger Q  = 104,020, MR-Egger p  = 0,103; IVW Q  = 105,547, IVW p  = 0,098; Tabel 6 ), yang menunjukkan bahwa tidak ditemukan heterogenitas. Nilai p dari Egger_intercept juga lebih besar dari 0,05, yang menunjukkan tidak adanya pleiotropi horizontal (Egger_intercept = 2,056E-03, p  = 0,262; Tabel 6 ). Selain itu, analisis penghilangan satu SNP menunjukkan bahwa penghilangan satu SNP pun tidak berdampak pada hasil (Gambar S1 ).

TABEL 6. Uji heterogenitas dan pleiotropi analisis MR.

Catatan: Teks yang dicetak tebal merupakan hasil uji heterogenitas dan pleiotropi untuk hubungan kausal Omega-6/Total FA (paparan) dan gangguan tidur (hasil) yang diidentifikasi melalui analisis randomisasi Mendel pada Gambar 4 .

4 Diskusi
Studi terkini, yang memanfaatkan data dari Survei Pemeriksaan Kesehatan dan Gizi Nasional (NHANES) dari tahun 2005 hingga 2018, memberikan pemeriksaan komprehensif tentang hubungan antara asupan asam lemak tak jenuh ganda omega-3 (ω-3) dan omega-6 (ω-6) dengan gangguan tidur di kalangan orang dewasa AS. Temuan kami mengungkapkan bahwa peserta dengan asupan asam lemak tak jenuh ganda ω-3 yang lebih tinggi memiliki risiko gangguan tidur yang lebih rendah, sejalan dengan semakin banyaknya literatur yang menunjukkan peran asam lemak ω-3 yang bermanfaat dalam kesehatan tidur (Montgomery et al. 2014 ; Del Brutto et al. 2016 ). Namun, analisis randomisasi Mendelian (MR) kami menunjukkan bahwa rasio ω-6 yang lebih tinggi terhadap kadar asam lemak total secara kausal dikaitkan dengan risiko gangguan tidur yang lebih rendah (IVW OR = 0,930, 95% CI: 0,880–0,983, p  = 0,011), sebuah temuan baru yang menambah kedalaman pemahaman kita tentang peran lemak makanan dalam modulasi tidur (Murphy et al. 2022 ). Hasil tersebut memberikan kontribusi yang signifikan di bidang ini, mengingat hasil yang tidak konsisten dari studi observasional (Reutrakul dan Van Cauter 2018 ).

Tidur merupakan fenomena fisiologis yang sangat penting bagi manusia dan dipengaruhi oleh berbagai faktor lingkungan dan ciri-ciri riwayat hidup (Allada dan Siegel 2008 ; Joiner 2016 ). Hubungan antara asupan asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) dan tidur telah menjadi subjek penelitian yang luas, dengan temuan yang tidak konsisten. Keluarga asam lemak ω-3, yang sebagian besar terdiri dari asam alfa-linolenat, asam eikosapentaenoat (EPA) dan asam dokosaheksaenoat (DHA), dikenal karena sifat anti-inflamasi dan anti-oksidatifnya (Oh et al. 2010 ; Weldon et al. 2007 ; Xue et al. 2012 ). Beberapa studi hewan mengungkapkan bahwa ω-3 FA dapat dikaitkan dengan permulaan dan pemeliharaan tidur dengan mengatur komposisi melatonin dan struktur membran neuronal (Catala 2010 ; Zhang et al. 1998 ; Kim et al. 1999 ; Yehuda et al. 1998 ). Sementara beberapa studi telah melaporkan hubungan positif antara kadar ω-3 FA dan kualitas tidur manusia (Montgomery et al. 2014 ; Scorza et al. 2013 ), studi lain tidak menemukan hubungan atau bahkan hubungan negatif (Cohen et al. 2014 ; Hansen et al. 2014 ; Zhang et al. 2022 ). Misalnya, studi cross-sectional yang menggunakan analisis bootstrap dan rolling-window oleh Liu et al. menunjukkan bahwa asupan DHA dikaitkan dengan peningkatan durasi tidur di antara wanita berusia > 44 tahun (Liu et al. 2024 ). Perbedaan antara temuan mereka dan temuan kami mungkin berasal dari beberapa faktor utama. Pertama, penelitian ini menilai hasil terkait tidur yang berbeda: sementara investigasi kami meneliti gangguan tidur umum, Liu et al. secara khusus berfokus pada durasi tidur yang sangat pendek (<5 jam). Kedua, populasi penelitian berbeda secara substansial—analisis kami mencakup kelompok orang dewasa yang luas, sedangkan Liu et al. melakukan analisis yang dikelompokkan berdasarkan usia dan jenis kelamin, mengungkap hubungan yang lebih bernuansa. Ketiga, perbedaan metodologi kemungkinan berkontribusi pada hasil yang berbeda; khususnya, pendekatan randomisasi Mendelian kami kontras dengan teknik rolling-window dan bootstrap mereka. Bukti pendukung dari uji coba terkontrol acak (RCT) menunjukkan bahwa suplementasi DHA meningkatkan kualitas tidur pada orang dewasa yang sehat (Patan et al. 2021 ; Yokoi-Shimizu et al. 2022 ; Jackson 2025 ). Sebaliknya, intervensi yang kaya EPA tidak menunjukkan efek signifikan pada subkelompok tertentu, seperti wanita menopause dan penderita migrain (Jackson 2025). Lebih jauh, Gangitano et al. mensintesis bukti yang menunjukkan bahwa pola makan tinggi lemak—terutama yang kaya akan lemak jenuh—dapat berdampak buruk pada kualitas tidur dengan menginduksi desinkroni sirkadian dan mengganggu ekspresi gen yang berhubungan dengan metabolik dan jam (Gangitano et al. 2023 ). Akan tetapi, efek asam lemak tak jenuh (misalnya, asam lemak tak jenuh ganda ω-3 dan ω-6) pada arsitektur tidur masih belum meyakinkan (Gangitano et al. 2023 ). Temuan studi kami lebih selaras dengan kelompok sebelumnya, yang menunjukkan peran menguntungkan asam lemak ω-3 dalam kesehatan tidur. Secara keseluruhan, perbedaan dalam temuan ini dapat dikaitkan dengan variasi dalam desain studi, karakteristik populasi, dan metode yang digunakan untuk menilai gangguan tidur. Penggunaan analisis pengacakan Mendelian (MR) kami untuk mengevaluasi efek kausal menunjukkan kemajuan metodologis yang signifikan atas studi observasional yang lebih sederhana (Burgess et al. 2012 ). Sebuah studi MR baru-baru ini oleh Zuo et al. mengeksplorasi hubungan kausal antara insomnia, asam lemak yang bersirkulasi, dan gagal jantung (Zuo et al. 2025 ). Temuan mereka mengungkapkan bahwa insomnia yang diprediksi secara genetik secara signifikan meningkatkan risiko gagal jantung, dengan asam lemak—terutama jenis jenuh dan tak jenuh tunggal—menengahi hubungan ini. Menariknya, sementara kadar ω-3 yang lebih tinggi berkorelasi terbalik dengan insomnia, mereka menunjukkan hubungan positif dengan risiko gagal jantung (Zuo et al. 2025 ). Hasil ini kontras dengan analisis MR kami, yang mengidentifikasi efek perlindungan dari rasio ω-6 yang lebih tinggi terhadap asam lemak total terhadap gangguan tidur. Perbedaan antara kedua penelitian tersebut mungkin berasal dari beberapa faktor. Pertama, ukuran hasil dalam penelitian mereka adalah insomnia, sementara penelitian kami berfokus pada konsep gangguan tidur yang lebih luas, yang mungkin mencakup berbagai jenis masalah terkait tidur. Definisi dan pengukuran hasil yang berbeda dapat menyebabkan hasil yang berbeda. Kedua, faktor pengganggu yang tidak terukur, seperti status kesehatan mental dalam penelitian tidur atau disfungsi metabolik dalam penelitian kardiovaskular, dapat secara berbeda membiaskan hubungan yang diamati. Ketiga, cakupan asam lemak yang diperiksa bervariasi: Zuo et al. menilai spektrum luas asam lemak dalam jalur kardiometabolik yang kompleks, sedangkan penelitian kami secara khusus menyelidiki asam lemak tak jenuh ganda (PUFA) dan rasionya dalam kaitannya dengan kesehatan tidur.

Meskipun demikian, fungsi asam lemak ω-6 dalam tidur masih belum pasti. Beberapa penelitian telah mengusulkan bahwa asam lemak ω-6 mungkin memiliki peran yang berbeda dalam modulasi tidur dibandingkan dengan asam lemak ω-3 (Tang et al. 2018 ). Temuan kami bertentangan dengan beberapa penelitian sebelumnya, yang telah menunjukkan hubungan positif antara asupan/kadar asam lemak ω-6 dan gangguan tidur (Luo et al. 2021 ; Sanders et al. 2023 ). Perbedaan ini mungkin disebabkan oleh perbedaan pola makan, faktor genetik, atau jenis asam lemak ω-6 tertentu yang dikonsumsi, dan penyelidikan lebih lanjut diperlukan.

Salah satu kekuatan utama studi kami adalah sampel besar orang dewasa AS yang mewakili negara, yang memungkinkan generalisasi temuan kami lebih besar. Lebih jauh, pemanfaatan teknik statistik yang canggih, termasuk regresi multivariat dan analisis MR, memfasilitasi pemahaman yang lebih rumit tentang hubungan timbal balik antara konsumsi PUFA dan gangguan tidur, sambil memperhitungkan faktor-faktor pengganggu potensial seperti usia, jenis kelamin, ras, dan variabel gaya hidup (Hysing et al. 2018 ; Cornu et al. 2010 ). Penerapan analisis spline kubik terbatas memungkinkan eksplorasi hubungan non-linier, yang mengungkapkan hubungan berbentuk U antara asupan FA ω-3 dan ω-6 dan gangguan tidur. Temuan ini belum banyak dilaporkan dalam literatur (Luo et al. 2021 ). Kekuatan lain adalah kontrol yang ketat untuk variabel pengganggu, yang meningkatkan keandalan hasil. Berbagai macam kovariat disesuaikan, termasuk status sosial ekonomi, aktivitas fisik, dan status merokok, yang diketahui memengaruhi asupan PUFA dan gangguan tidur (Reutrakul dan Van Cauter 2018 ; Yaffe et al. 2014 ). Pemanfaatan analisis MR berfungsi untuk memperkuat temuan penelitian ini, karena menyediakan metodologi yang melaluinya kausalitas dapat disimpulkan dari data observasional. Ini merupakan kemajuan signifikan atas metodologi yang digunakan dalam penelitian cross-sectional tradisional (Burgess et al. 2012 ).

Meskipun penelitian ini memiliki beberapa kelebihan, penting untuk mengakui keterbatasan penelitian ini. Sifat data NHANES yang bersifat cross-sectional menghalangi penetapan kausalitas dan inferensi temporalitas dalam hubungan antara asupan PUFA dan gangguan tidur. Lebih jauh lagi, asupan makanan dievaluasi melalui ingatan makanan 24 jam yang dilaporkan sendiri, yang mungkin rentan terhadap bias ingatan dan mungkin tidak secara akurat mencerminkan kebiasaan makanan jangka panjang (Zhong et al. 2024 ). Selain itu, generalisasi temuan kami mungkin dibatasi oleh fakta bahwa populasi penelitian kami terbatas pada warga sipil AS yang tidak dirawat di lembaga. Lebih jauh lagi, keakuratan data dipengaruhi oleh bias ingatan, yang merupakan masalah umum dalam epidemiologi gizi. Ini merupakan keterbatasan inheren dari penelitian yang mengandalkan data asupan makanan yang dilaporkan sendiri, dan penelitian kami tidak terkecuali. Penggunaan ukuran objektif asupan makanan, seperti biomarker, dalam penelitian mendatang dapat membantu mengatasi keterbatasan ini (Li et al. 2024 ). Keterbatasan lebih lanjut adalah potensi adanya faktor pengganggu yang tidak terukur. Meskipun penyesuaian untuk berbagai macam variabel pengganggu potensial telah dilakukan, ada kemungkinan bahwa faktor-faktor lain yang memengaruhi asupan PUFA dan gangguan tidur tidak sepenuhnya diperhitungkan dalam analisis. Misalnya, kondisi kesehatan mental, seperti depresi dan kecemasan, telah terbukti memengaruhi kebiasaan tidur dan pola makan. Namun, faktor-faktor ini tidak sepenuhnya tertangkap dalam penelitian kami (Irmisch et al. 2007 ). Selain itu, perlu dicatat bahwa ukuran hasil gangguan tidur didasarkan pada data yang dilaporkan sendiri, yang mungkin tidak seakurat diagnosis klinis. Penelitian mendatang yang menggunakan ukuran tidur objektif, seperti polisomnografi, dapat menghasilkan estimasi yang lebih tepat tentang hubungan antara asupan PUFA dan gangguan tidur (Xu et al. 2022 ).

Temuan dari studi kami memiliki beberapa implikasi untuk penelitian masa depan dan praktik kesehatan masyarakat. Hasil studi ini menunjukkan bahwa peningkatan asupan ω-3 FA dan pemeliharaan rasio seimbang ω-6 terhadap total asam lemak dapat bermanfaat untuk kesehatan tidur. Temuan ini berpotensi untuk menginformasikan pedoman kesehatan masyarakat dan berkontribusi pada pengembangan intervensi nutrisi yang ditargetkan yang ditujukan untuk meningkatkan kualitas tidur dan kesehatan secara keseluruhan (Jaqua et al. 2023 ). Akan bermanfaat bagi penelitian masa depan untuk bertujuan mereplikasi hasil ini dalam studi longitudinal dan uji klinis, dan untuk mengeksplorasi mekanisme yang mendasari hubungan yang diamati. Selain itu, studi intervensi lebih lanjut diperlukan untuk menetapkan rekomendasi diet yang optimal untuk pencegahan dan pengobatan gangguan tidur. Selain itu, studi masa depan harus berupaya untuk mengatasi keterbatasan studi saat ini dengan menggunakan ukuran objektif asupan makanan dan hasil tidur, dan dengan memperhitungkan faktor pengganggu potensial seperti kondisi kesehatan mental (Miller dan Howarth 2023 ).

Sebagai kesimpulan, penelitian kami memberikan wawasan baru tentang hubungan antara asupan PUFA dan gangguan tidur, yang menunjukkan potensi manfaat modifikasi pola makan untuk kesehatan tidur. Meskipun temuan kami menggembirakan, penelitian lebih lanjut diperlukan untuk memastikan kausalitas dan mengembangkan rekomendasi pola makan berbasis bukti untuk pencegahan dan pengobatan gangguan tidur.